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標準品的有關報告
公司是一家專業研發,經營生物、儀器、試劑、耗材的公司,是一家經國家相關部門批準注冊的企業。主要經營許多*水平的高科技產品,包括各種試劑,ELISA試劑盒,氨基酸、分離試劑、蛋白質、碳水化合物、植物激素、表面活性劑、緩沖液、染色液,抗生素、維生素和酶類,儀器儀表,標準對照品,實驗試劑,試管,滴管,培養皿等及應用領域等產品。
標準品
1 材料 苯乙酮(AR、上海試劑一廠) ,對羥基苯甲酸甲酯(AR、北京化學試劑公司) ,對氨基 苯甲酸(AR、國藥集團化學試劑有限公司) ,硅膠(200-300 目、青島海洋化工) ,PP 柱(4g、 SEPA FLASH 預裝柱) ,石油醚(60℃-90℃、上海萊盈化工有限公司) ,乙酸乙酯(上海萊 盈化工) 。 2 樣品制備 2.1 分別稱量對氨基苯甲酸、對羥基苯甲酸甲酯各 1g,混合后溶于 20ml 乙酸乙酯; 2.2 精密稱定苯乙酮 2.0g,與上述 2.1 乙酸乙酯溶液 5ml 混合均勻后,加入 50ml 乙酸 乙酯混勻; 2.3 稱取 22.5g 硅膠,與 2.2 的溶液混合攪拌均勻,蒸干其中所含的乙酸乙酯,即得。 3 制備色譜 色譜條件 色譜柱:SEPA FLASH 預裝柱 4g,40-60µm;流動相:石油醚-乙酸乙酯;
流速:18ml/min;監測波長:254nm;柱溫:室溫;上樣量:450mg。 根據以上色譜條件, 采用 254nm 進行收集。 分別用乙酸乙酯-石油醚 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%各濃度進 行等度分離,譜圖如下:
采用梯度分離,結果分離良好,且節約了分離時間,譜圖如下:
4 薄層色譜 樣品:取 2 所述樣品少量,加少量乙酸乙酯溶解,取溶液點樣。 展開劑:分別以乙酸乙酯-石油醚 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%進 行薄層層析。 以上濃度對應的薄層色譜如下:
Rf3 Rf2
Rf1
展開劑 (石油醚:乙酸乙酯) 9:1 8:2 7:3 6:4 5:5 4:6 3:7 2:8
Rf1 0.00 0.03 0.16 0.30 0.38 0.50 0.72 0.73
Rf2 0.28 0.30 0.60 0.75 0.79 0.84 0.92 0.90
Rf3 0.59 0.67 0.85 0.89 0.91 0.93
標準品
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