請看這份流式細(xì)胞儀的調(diào)試和使用規(guī)范
【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】古語說:“工欲善其事,必先利其器”。要想很好地應(yīng)用流式細(xì)胞分析和分選技術(shù),必需先對儀器進(jìn)行調(diào)試,使其處于良好的工作狀態(tài),并能正確使用儀器。下面簡要介紹細(xì)胞計的調(diào)試項(xiàng)目及要點(diǎn)、使用的程序等等。
調(diào)試和校準(zhǔn)
流式細(xì)胞儀在使用前,甚至在使用過程中都要精心進(jìn)行調(diào)試,以保證工作的可靠性和性。調(diào)試的項(xiàng)目主要是激光強(qiáng)度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
激光強(qiáng)度:除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外,還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為大。
液流速度:可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督,調(diào)節(jié) 氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
測量區(qū)光路調(diào)節(jié):這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成。
操作和使用
1. 打開電源,對系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱;
2. 打開氣體閾,調(diào)節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
3. 在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
4. 利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,0和90散射的熒光強(qiáng)度強(qiáng),并要求變異系數(shù)為小;
5. 選定流速、測量細(xì)胞數(shù)、測量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機(jī)屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進(jìn)程;
6. 樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
7. 因?yàn)閷?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已存入計算機(jī)硬盤(有的機(jī)器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測量裝置,而單獨(dú)使用計算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;
8. 將所需結(jié)果打印出來。
操作和使用中的注意事項(xiàng)
1. 光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強(qiáng)的光線下以后,需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
2. 光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
3. 液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒;
4. 注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
5. 特別強(qiáng)調(diào)每次測量都需要對照組。
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