色譜柱常見問題（一）

　　【化工儀器網技術指導】色譜柱是色譜的重要配件，了解色譜柱有助于我們更好的使用色譜儀。

　　1、色譜柱的柱子是否可以反沖？什么樣的柱子可以反沖，什么不可以？反沖后是正著用，還是反著用？

　　一般的正相反相柱應該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經比較少見。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。因此，我們提倡正向使用，反向沖洗。

　　2、拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護？為什么要這樣做？

　　新柱活化實際上是一個平衡的過程，除了用流動相平衡外，有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽時。平衡方式即多進幾次樣品，直到峰面積和保留時間穩定，再進行正式進樣測定。如果要加快平衡時間，把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續進樣多針。

　　用待測物對新柱平衡，目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和。

　　3、測定多肽，一般采用什么柱子？

　　分子量不高的多肽一般選用常規C18柱就能測定。也可以用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱。

　　4、氨基柱在進酸性樣品時，使用一段時間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復？

　　氨基柱測酸性樣品，應該是用氨基柱的HILIC模式。使用后，用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱，沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨。

　　5、柱子在什么情況下可以清洗篩板呢？

　　柱頭污染了，就取出污染的，再裝一些填料。

　　5、如果柱子取下來放置一段時間，需要做什么保護嗎？

　　對一般的反相柱，需要在洗干凈后放到純甲醇(乙腈)或者是80%左右的甲醇(乙腈)水中，然后用堵頭塞緊柱兩頭，以免保存溶劑揮發。不需要做特殊的保護。

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