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酶抑制分光光度法介紹

2021年01月21日 10:34:08來源:化工儀器網(wǎng)點(diǎn)擊:4906
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化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】由農(nóng)藥殘留快速檢測儀生化檢測法開發(fā)的速測卡法(酶抑制顯色紙片法)和速測儀法(酶抑制分光光度法),前者在80年代在省級部門小范圍使用過,后被后者取代。目前我省廣泛使用農(nóng)藥殘留檢測方法主要有兩大類—色譜檢測法和速測儀法。色譜檢測法用作農(nóng)殘定量分析,可為農(nóng)藥殘留執(zhí)法提供依據(jù),主要分布在省級相關(guān)部門,部分地州也具有一定的檢測能力。速測儀法只能作農(nóng)殘定性分析,但它具有短時(shí)間能夠檢測大量樣本、檢測成本低,對于檢測人員技術(shù)水平要求低,易于在基層推廣等特點(diǎn),是目前我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法,也是目前國內(nèi)和我省應(yīng)用Z為廣泛的農(nóng)藥殘留快速檢測方法。廣泛用于蔬菜、水果生產(chǎn)基地和批發(fā)市場等,主要用來防止有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)的蔬菜和水果流入市場。
 
  一、有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥的作用機(jī)理
 
  有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲神經(jīng)中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累,影響正常傳導(dǎo),使昆蟲中毒致死。如果有有機(jī)磷農(nóng)藥存在,有機(jī)磷農(nóng)藥就與膽堿酯梅結(jié)合,膽堿酯酶就不能分解乙酰膽堿為乙酸和膽堿,造成乙酰膽堿在神經(jīng)肌接頭和體內(nèi)其它部位的過量積聚,引起一系列神經(jīng)中毒癥狀。
 
  二、乙酰膽堿酯酶抑制法(酶法)的作用原理
 
  從生物化學(xué)的角度看,有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥與乙酰膽堿是競爭性作用于膽堿酯酶的,即膽堿酯酶可以與乙酰膽堿結(jié)合,催化乙酰膽堿生成乙酰和膽堿,另一方面,如果膽堿酯酶與有機(jī)磷農(nóng)藥結(jié)合,就阻斷了反應(yīng)的進(jìn)行。根據(jù)這個(gè)原理,就可以利用膽堿酯酶的催化反應(yīng)的抑制法,設(shè)計(jì)一種通過顏色變化的直觀的檢測方法,來快速檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留情況。因此,生物化學(xué)法(酶法)就是利用某種酶受影響的程度來反映農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量。
 
  三、速測儀法(酶抑制分光光度法)方法原理
 
  乙酰膽堿酯酶水解后,水解產(chǎn)物可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥可以抑制乙酰膽堿酯酶的活性,使這種酶不能被水解,從而無顯色反應(yīng)。在溶液中加入乙酰膽堿酯酶和顯色劑,用此判斷有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留是否存在。在溶液中反應(yīng)后,用分光光度計(jì)測定吸光值隨時(shí)間的變化,計(jì)算出抑制率,以此判斷蔬菜中含有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的情況。
 
  四、速測儀法的優(yōu)缺點(diǎn):
 
  優(yōu)點(diǎn):在于簡單方便,快捷、成本低廉。整個(gè)檢測過程只需30分鐘左右,它可以作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補(bǔ)充,針對市場、農(nóng)場蔬菜農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速篩選監(jiān)測,保證上市蔬菜食用的相對安全性。
 
  缺點(diǎn):酶試劑易失活,導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定,檢測結(jié)果誤差較大,重復(fù)性不好,實(shí)際應(yīng)用中的確認(rèn)率大約為60%~70%左右;存在檢測盲區(qū),只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥,不能檢測有機(jī)氯類、菊酯和其它類別的劇毒農(nóng)藥;不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等14種容易出現(xiàn)假陽性的農(nóng)產(chǎn)品;需要對檢測人員進(jìn)行專門培訓(xùn),否則將會對出現(xiàn)的問題無法正確處理或判斷,得出錯誤的結(jié)果。由農(nóng)藥殘留快速檢測儀生化檢測法開發(fā)的速測卡法(酶抑制顯色紙片法)和速測儀法(酶抑制分光光度法),前者在80年代在省級部門小范圍使用過,后被后者取代。目前我省廣泛使用農(nóng)藥殘留檢測方法主要有兩大類—色譜檢測法和速測儀法。色譜檢測法用作農(nóng)殘定量分析,可為農(nóng)藥殘留執(zhí)法提供依據(jù),主要分布在省級相關(guān)部門,部分地州也具有一定的檢測能力。速測儀法只能作農(nóng)殘定性分析,但它具有短時(shí)間能夠檢測大量樣本、檢測成本低,對于檢測人員技術(shù)水平要求低,易于在基層推廣等特點(diǎn),是目前我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法,也是目前國內(nèi)和我省應(yīng)用Z為廣泛的農(nóng)藥殘留快速檢測方法。廣泛用于蔬菜、水果生產(chǎn)基地和批發(fā)市場等,主要用來防止有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)的蔬菜和水果流入市場。
 
  一、有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥的作用機(jī)理
 
  有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲神經(jīng)中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累,影響正常傳導(dǎo),使昆蟲中毒致死。如果有有機(jī)磷農(nóng)藥存在,有機(jī)磷農(nóng)藥就與膽堿酯梅結(jié)合,膽堿酯酶就不能分解乙酰膽堿為乙酸和膽堿,造成乙酰膽堿在神經(jīng)肌接頭和體內(nèi)其它部位的過量積聚,引起一系列神經(jīng)中毒癥狀。
 
  二、乙酰膽堿酯酶抑制法(酶法)的作用原理
 
  從生物化學(xué)的角度看,有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥與乙酰膽堿是競爭性作用于膽堿酯酶的,即膽堿酯酶可以與乙酰膽堿結(jié)合,催化乙酰膽堿生成乙酰和膽堿,另一方面,如果膽堿酯酶與有機(jī)磷農(nóng)藥結(jié)合,就阻斷了反應(yīng)的進(jìn)行。根據(jù)這個(gè)原理,就可以利用膽堿酯酶的催化反應(yīng)的抑制法,設(shè)計(jì)一種通過顏色變化的直觀的檢測方法,來快速檢測有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留情況。因此,生物化學(xué)法(酶法)就是利用某種酶受影響的程度來反映農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量。
 
  三、速測儀法(酶抑制分光光度法)方法原理
 
  乙酰膽堿酯酶水解后,水解產(chǎn)物可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥可以抑制乙酰膽堿酯酶的活性,使這種酶不能被水解,從而無顯色反應(yīng)。在溶液中加入乙酰膽堿酯酶和顯色劑,用此判斷有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留是否存在。在溶液中反應(yīng)后,用分光光度計(jì)測定吸光值隨時(shí)間的變化,計(jì)算出抑制率,以此判斷蔬菜中含有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的情況。
 
  四、速測儀法的優(yōu)缺點(diǎn):
 
  優(yōu)點(diǎn):在于簡單方便,快捷、成本低廉。整個(gè)檢測過程只需30分鐘左右,它可以作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補(bǔ)充,針對市場、農(nóng)場蔬菜農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速篩選監(jiān)測,保證上市蔬菜食用的相對安全性。
 
  缺點(diǎn):酶試劑易失活,導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定,檢測結(jié)果誤差較大,重復(fù)性不好,實(shí)際應(yīng)用中的確認(rèn)率大約為60%~70%左右;存在檢測盲區(qū),只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥,不能檢測有機(jī)氯類、菊酯和其它類別的劇毒農(nóng)藥;不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等14種容易出現(xiàn)假陽性的農(nóng)產(chǎn)品;需要對檢測人員進(jìn)行專門培訓(xùn),否則將會對出現(xiàn)的問題無法正確處理或判斷,得出錯誤的結(jié)果。

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深圳傅里葉紅外光譜儀中標(biāo)結(jié)果公告 2025-01-06 10:10:23
項(xiàng)目名稱:傅里葉紅外光譜儀,項(xiàng)目編號:0664-2440SUMECT03,招標(biāo)范圍:傅里葉紅外光譜儀,招標(biāo)機(jī)構(gòu):蘇美達(dá)國際技術(shù)貿(mào)易有限公司,招標(biāo)人:深圳市匯芯通信技術(shù)有限公司
939.5萬 安徽衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院采購實(shí)驗(yàn)室儀器 2025-01-06 09:24:00
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預(yù)算205萬 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)采購實(shí)驗(yàn)室儀器(農(nóng)業(yè)環(huán)境健康平臺) 2025-01-03 14:23:53
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3228萬大單!南京農(nóng)業(yè)大學(xué)采購實(shí)驗(yàn)室儀器(動物疫病與生物安全平 2025-01-03 10:00:51
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合肥綜合性科學(xué)中心環(huán)境研究院皮米級分辨率虛像相位陣列近紅外光 2025-01-02 10:43:13
項(xiàng)目名稱:合肥綜合性科學(xué)中心環(huán)境研究院皮米級分辨率虛像相位陣列近紅外光譜儀采購。項(xiàng)目編號:0622-244017005040。招標(biāo)范圍:合肥綜合性科學(xué)中心環(huán)境研究院皮米級分辨率虛像相位陣列近紅外光譜儀采購,數(shù)量 1套 ,具體詳見招標(biāo)文件。招標(biāo)機(jī)構(gòu):安徽省招標(biāo)集

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