人來源細胞外囊泡的定性和定量分析
CD9/63/81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP)
CD9 / CD63 / CD81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP)可用于檢測和定量細胞培養上清和體液樣品中的外泌體。外泌體標記蛋白抗CD9 / CD63 / CD81抗體固相化后,可捕獲表達抗CD9 / CD63 / CD81抗體的外泌體。此外,抗體與CD9、CD63、CD81特異性結合,可用于檢測和定量人來源的外泌體。
◆特點
● 特異性檢測人來源外泌體
● 無需分離外泌體,可直接檢測培養上清及血液樣品中的外泌體
● 和外泌體標準品配合使用,可定量分析外泌體
● 操作簡便,再現性高
◆檢測原理
PS Capture™ Exosome ELISA Kit系列(圖右)不依賴動物種屬,可以捕獲具有磷脂酰絲-氨-酸的細胞外囊泡,本試劑盒(圖左)可以特異性捕獲人CD9/63/81標記的細胞外囊泡,即使使用小鼠和大鼠等實驗動物以及含有FBS等的牛來源細胞外囊泡的樣品,也可以特異性捕獲和檢測人來源CD9/63/81的陽性細胞外囊泡。
◆應用數據
向小鼠EDTA血漿中添加人來源外泌體的加標回收實驗
向小鼠EDTA血漿(稀釋2倍)中添加各濃度的外泌體(COLO201細胞來源,純化品)(產品編號:052-09301),使用本試劑盒進行檢測后對稀釋樣品進行線性分析。
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| 樣品:純化后各濃度的COLO201細胞來源的外泌體和小鼠EDTA血漿 檢測:CD9/63/81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒
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【結果】
結果顯示,可以很好的對小鼠EDTA血漿樣品中添加的人來源外泌體進行稀釋后的線性分析。
比較人來源細胞系培養上清的表達水平
使用本試劑盒檢測分別稀釋2、10、25和100倍的12種人源細胞的培養上清。
CD9-Capture 人外泌體ELISA試劑盒
CD63-Capture 人外泌體ELISA試劑盒
CD81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒
【結果】
結果顯示,CD9、CD63、CD81的表達水平因細胞種類而異。這一結果與使用PS Capture 外泌體ELISA試劑盒(抗小鼠IgG HRP)(產品編號:297-79201)所得的 “各種細胞培養的外泌體標記蛋白表達分析 ”數據相似。
※ 部分細胞系在稀釋2倍和10倍時會檢測不到信號,這是因為信號太強,超過了儀器的檢測上限。
人來源外泌體檢測中的特異性比較
檢測試劑盒:
PS Capture™ 外泌體ELISA Kit (鏈霉親和素HRP) 【產品編號:298-80601】
CD9-Capture 人外泌體ELISA試劑盒 (鏈霉親和素HRP)【產品編號:296-83701】
檢測樣品:添加了各濃度純化COLO201外泌體的含10%FBS的D-MEM培養基
※ 使用超速離心處理的FBS
檢測抗體:抗CD9,單抗(1K)【產品編號:014-27763】
※ 使用生-物-素標記的人/牛交叉反應的CD9抗體。
將添加了各濃度的外泌體,COLO201細胞來源,純化品(產品編號:052-09301)的含10%FBS的D-MEM樣品(2倍稀釋)分別加入到兩款ELISA試劑盒中進行反應,使用人/牛交叉反應的CD9抗體(Clone : 1K)【產品編號:014-27763】作為檢測抗體,并對人來源外泌體進行定量。
PS Capture™ ELISA不僅可以捕獲人來源外泌體,還可以捕獲FBS來源外泌體。CD9-Capture ELISA由于固相化了人特異性抗體,只能特異性檢測不同濃度的人來源外泌體。
◆外泌體檢測/定量ELISA試劑盒選擇表
系列名稱 | PS Capture™ Exosome ELISA Kit | CD9/63/81-Capture Human Exosome ELISA Kit | |||
產品編號 | 297-79201 | 298-80601 | 296-83701 | 290-83601 | 292-83801 |
產品名稱 | PS Capture™ 外泌體ELISA試劑盒 (抗小鼠IgG POD) | PS Capture™ 外泌體ELISA Kit (鏈霉親和素HRP) | CD9-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | CD63-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | CD81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) |
產品規格 | 96 tests | 96 tests | 96 tests | 96 tests | 96 tests |
捕獲分子 | Tim4蛋白 | Tim4蛋白 | 抗人CD9抗體 (宿主:大鼠) | 抗人CD63抗體 (宿主:小鼠) | 抗人CD81抗體 (宿主:小鼠) |
檢測抗體 | 抗人CD63抗體 (宿主:小鼠) | 抗人CD63抗體 (宿主:小鼠) | 抗人CD9抗體 (宿主:大鼠) | 抗人CD63抗體 (宿主:小鼠) | 抗人CD81抗體 (宿主:大鼠) |
酶與一抗結合的方法 | 二抗 | 生/物/素-鏈酶親和素 | 生/物/素-鏈酶親和素 | 生/物/素-鏈酶親和素 | 生/物/素-鏈酶親和素 |
樣品類型 | 純化外泌體 培養上清液※1 | 純化外泌體 細胞培養上清液 體液(血清、血漿等) | 純化外泌體 細胞培養上清液 體液(血清、血漿等) | 純化外泌體 細胞培養上清液 體液(血清、血漿等) | 純化外泌體 細胞培養上清液 體液(血清、血漿等) |
交叉物種 | 人、小鼠、大鼠等※2 | 人、小鼠、大鼠等※2 | 人 | 人 | 人 |
檢測對象 | PS陽性外泌體※3 | PS陽性外泌體※3 | 人CD9陽性外泌體 | 人CD63陽性外泌體 | 人CD81陽性外泌體 |
※1 檢測用二抗會與人、小鼠、大鼠的IgG發生非特異性反應,因此不可用于血清/血漿的檢測。
※2 試劑盒提供的抗體為抗人CD63抗體,因此對人以外的實驗對象進行檢測時需要另外準備合適的抗體。
※3 如使用的不是去除外泌體的FBS,則需要另外檢測FBS來源的PS陽性外泌體。
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 |
296-83701 | CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD9-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | 96 tests | 基因研究用 |
290-83601 | CD63-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD63-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | 96 tests | 基因研究用 |
292-83801 | CD81-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD81-Capture 人外泌體ELISA試劑盒(鏈霉親和素HRP) | 96 tests | 基因研究用 |
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019-27953 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (30B) , Biotin Conjugated | 100 uL | 免疫化學用 |
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019-28173 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (77B) | 100 uL | 免疫化學用 |
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019-27713 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) , Biotin Conjugated | 100 μL | 免疫化學用 |
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