使用對象

IAC-SEP^®*總量免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的*B1。*免疫親和柱廣泛地應用于糧食、食品、飼料、堅果、花生、醬油、醋、辣椒、胡椒、藥材和酒類等樣品的提取，該方法速度快、操作簡單、準確性高，對準確靈敏的測定樣品中中的*B1起到十分重要的作用。

IAC-SEP^®*B1免疫親和柱適用于以下標準：

GB/T 18979-2003 食品中*的測定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法

SN/T 1101-2002 進出口油籽及糧谷中*的檢測方法

原理

樣品經甲醇+水提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有*B1特殊抗體的免疫親和柱。此時，*被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將*B1從親和柱上洗脫下來。zui后，用HPLC或熒光計進行定量檢測。

儲存條件

該親和柱保存在2-8 °C條件下，不能冷凍，保質期為18個月。建議在室溫（18-30°C）下使用。

實驗溶液制備

提取液，甲醇/水（8+2）：取80mL甲醇加20mL水，混合均勻。

        甲醇/水（7+3）：取70mL甲醇加30mL水，混合均勻。

HPLC流動相，甲醇/水（45+55）：取450mL甲醇加550mL水，混合均勻，用0.22微米的尼龍篩過濾。

標準溶液的配制：取*B1儲備液，流動相為稀釋液，配制標準品溶液。            

   注：配制好的標準品溶液2-8℃冷藏保存有效期為24h。

pH 7.0 PBS溶液：稱取8.0g氯化鈉，1.44g磷酸氫二鈉，0.24g磷酸二氫鉀，0.2g氯化鉀，用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調節pH值至7.0，zui后用純水稀釋至1000mL。

0.1%的吐溫/PBS：將1.0mL吐溫-20加入到1L pH 7.0 PBS溶液中，混勻。

液相色譜條件

色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

流動相：甲醇-水（45+55，v/v）

流速：0.8mL/min

檢測器：熒光檢測器，激發波長360nm,發射波長440nm

進樣體積：20~100uL

光化學衍生化系統：光化學衍生器（連接于色譜柱后，然后通向熒光檢測器）