使用對(duì)象

IAC-SEP^®嘔吐毒素免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的嘔吐毒素。嘔吐毒素免疫親和柱廣泛地應(yīng)用于糧食、食品、飼料、酒類、醬油、醋、醬及醬制品等樣品的提取，該方法速度快、操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性高，對(duì)準(zhǔn)確靈敏的測(cè)定樣品中的嘔吐毒素起到十分重要的作用。

IAC-SEP^®嘔吐毒素免疫親和柱適用于以下標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T 23503-2009 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測(cè)定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法

SN/T 1571-2005 進(jìn)出口糧谷中嘔吐毒素檢測(cè)方法-液相色譜法

原理

樣品經(jīng)甲醇+水提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時(shí)，嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來。zui后，用HPLC或熒光計(jì)進(jìn)行定量檢測(cè)。

儲(chǔ)存條件

該親和柱保存在2-8 °C條件下，不能冷凍，保質(zhì)期為18個(gè)月。建議在室溫（18-30°C）下使用。

實(shí)驗(yàn)溶液制備

HPLC流動(dòng)相:乙腈/水（1+9）：取100mL乙腈于1L容量瓶中，用純水定容至1L，用0.22微米的尼龍篩過濾。

            甲醇/水（2+8）：取200mL甲醇于1L容量瓶中，用純水定容至1L，用0.22微米的尼龍篩過濾。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，流動(dòng)相為稀釋液，配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。例如：取100uL標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液100ug/mL于10mL容量瓶中，用流動(dòng)相定容至10mL，那么，嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品濃度為1.0ug/mL             

 注：配制好的標(biāo)準(zhǔn)品溶液冷藏保存有效期為7天。

pH 7.0 PBS溶液：稱取8.0g氯化鈉，1.44g磷酸氫二鈉，0.24g磷酸二氫鉀，0.2g氯化鉀，用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0，zui后用純水稀釋至1000mL。

液相色譜條件

色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

流動(dòng)相：乙腈/水（1+9）或 甲醇/水（2+8）

流速：0.8mL/min

檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)218nm

進(jìn)樣體積：20~100uL