BC5925-100T/96S 果糖激酶(FRK)活性檢測試劑盒 微量法
- 公司名稱 北京索萊寶科技有限公司
- 品牌 SOLARBIO/索萊寶
- 型號 BC5925-100T/96S
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/8/2 9:31:34
- 訪問次數(shù) 1856
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生化試劑,分子生物學(xué)試劑,蛋白質(zhì)研究,抗體,細(xì)胞相關(guān)試劑,實(shí)驗(yàn)室耗材,標(biāo)準(zhǔn)品,ELISA試劑盒,實(shí)驗(yàn)室服務(wù)
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
貨號 | BC5925 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 果糖激酶(FRK)活性檢測 |
果糖激酶(FRK)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC5925
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體110mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
粉劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體8μL×2支 | -20℃保存 |
試劑六 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
溶液的配制:
1. 提取液:臨用前將粉劑一溶于提取液中;該試劑為懸濁液,使用前搖勻即可,2-8℃保存12周;
1. 試劑一:試劑放于試劑瓶內(nèi)玻璃管中。臨用前加入2.667mL蒸餾水,充分溶解。溶解后的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;
2. 試劑二:試劑放于試劑瓶內(nèi)玻璃管中。臨用前加入3.03mL蒸餾水,充分溶解。溶解后的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;
3. 試劑三:試劑放于試劑瓶內(nèi)玻璃瓶中,臨用前加入6mL蒸餾水溶解,溶解后的試劑2-8℃分裝保存4周;
4. 試劑五工作液:臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑五:蒸餾水=8μL:1000μL(共1008μL,約100T)的比例配制,充分混勻,現(xiàn)配現(xiàn)用;為了延長使用時(shí)間,此產(chǎn)品多給1支。
5. 試劑六:臨用前取一支試劑六加入1mL蒸餾水,充分溶解。溶解后的試劑-20℃分裝保存2周,避免反復(fù)凍融。(該試劑為凍干試劑,可能存在不同瓶間肉眼觀察試劑量相差較大甚至量很少的現(xiàn)象,此現(xiàn)象不影響使用,實(shí)際質(zhì)量相同)
產(chǎn)品說明:
果糖激酶(Fructokinase,F(xiàn)RK,EC 2.7.1.4)是催化果糖磷酸化的主要酶。果糖激酶可以作為植物的己糖感受器和信號分子,通過影響植物的生長周期來調(diào)控植物的代謝和生長發(fā)育進(jìn)程,果糖磷酸化對于維持淀粉生物合成方向具有重要意義。
FRK催化果糖合成6-磷酸果糖,6-磷酸果糖在磷酸己糖異構(gòu)酶的作用下異構(gòu)為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADH,NADH在340nm有特征吸收峰。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、分析天平、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體的操作步驟請見“產(chǎn)品資料”文件
注意事項(xiàng):
1. 如果?A小于0.005,可以增加樣本量或延長反應(yīng)時(shí)間再進(jìn)行測定;如果?A測定大于0.6或A1測定小于A1空白,建議將樣本稀釋或者縮短反應(yīng)時(shí)間再進(jìn)行測定。注意同步修改計(jì)算公式。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
1. 取0.1023g土豆組織樣本,加入提取液進(jìn)行冰浴勻漿,離心后取上清,按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計(jì)算:ΔA測定=A2測定-A1測定=0.137-0.080=0.057,ΔA空白=A2空白-A1空白=0.001-0.001=0,ΔA=ΔA測定- ΔA空白=0.057。按樣本質(zhì)量計(jì)算得:
FRK活性(U/g 質(zhì)量)=321.54×ΔA÷W = 179.157U/g 質(zhì)量。
2. 取0.06g酵母粉,加入提取液進(jìn)行冰浴勻漿,離心后取上清,按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計(jì)算:ΔA測定=A2測定-A1測定=0.705-0.202=0.503,ΔA空白=A2空白-A1空白=0.001-0.001=0,ΔA=ΔA測定- ΔA空白=0.503。按樣本質(zhì)量計(jì)算得:
FRK活性(U/g 質(zhì)量)=321.54×ΔA÷W =2695.58U/g 質(zhì)量。
參考文獻(xiàn):
[1] Giroix M H, Jijakli H, Courtois P, et al.Fructokinase activity in rat liver, ileum, parotid gland, pancreas, pancreatic islet, B and non-B islet cell homogenates.[J].International Journal of Molecular Medicine, 2006, 17(3):517-522.
[2] Kurt, Bergbauer, Ralf, et al. Studies on Fructose Metabolism in Cultured Astroglial Cells and Control Hepatocytes: Lack of Fructokinase Activity and Imrrunoreactivity in Astrocytes[J].Developmental Neuroscience, 2009, 18(5-6):371-379.
[3] Schaffer A A, Petreikov M. Inhibition of fructokinase and sucrose synthase by cytosolic levels of fructose in young tomato fruit undergoing transient starch synthesis[J].Physiologia Plantarum, 2010, 101(4):800-806.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
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