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描述：

組織微環境中有復雜的細胞組成，這些細胞的表型、狀態、豐度、分布都有著重要的生物學意義和臨床價值。借助抗體染色可以將其在組織原位上呈現出來。免疫組化染色是一種研究組織形態和原位蛋白表達的常見技術，常規IHC檢測只能展示單一指標，難以呈現復雜的組織微環境中的細胞組成、狀態和關系，而這些信息對疾病的診斷和治療至關重要！
酪氨信號放大技術原理：類似常規免疫組化的DAB顯色方法，TSA技術同樣采用HRP標記的二抗，HRP催化加入體系的熒光素底物，生產活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪an酸共價結合，使樣品上穩定的共價結合熒光素。之后用熱修復法洗去非共價結合的抗體，在換下一種一抗來第二輪孵育，換另一種熒光素底物，如此往復就可實現多重標記。

檢驗原理：

多重熒光免疫組化染色是基于抗原、抗體特異性結合的原理，選用辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗抗體，對試劑盒中的熒光染料進行活化，將信號共價結合到抗原上。借助于不同的熒光染料標記，通過多輪染色循環實現組織或細胞的原位多靶點染色。

應用：

主要用于組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。也可用于冰凍切片和細胞爬片，需搭配abs994 抗體洗脫液（mIHC專用）。

使用方法：

1.熒光染料的稀釋：若染料為干粉，使用100ulDMSO溶解，制成100X染料母液；若染料為液態表示出廠即為DMSO溶解的100X母液；使用信號放大反應液按1:100稀釋制備染料工作液（現用現配）；DAPI使用無菌水按1:100稀釋制備工作液。 

2.二抗的使用：該試劑盒搭配為鼠兔通用型二抗，不適用小鼠組織，實驗前請核實一抗種屬是否匹配。小鼠組織樣本請參考（#abs50029）。

注意事項：

1. 本試劑盒只用于免疫組化，不做其他用途。 

2. 本試劑盒僅限于專業人員使用。 

3. 應采用適當的防護措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。 

4. 超過有效期的試劑活性可能降低，因此不得使用超過有效期的試劑。 

5. 若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產品混合使用，在染色過程中可能出現異常情況。 

6. 脫蠟不干凈，容易影響染色效果。 

7. 為了防止可能出現的假陰性、假陽性結果，實驗過程中需有陽性對照及陰性對照同時進行。 

8. 使用本試劑盒中所產生的各種廢棄物都應按照《醫療廢物管理條例》進行處理。

參考文獻：

1. Mingzhu Yang, et al., Chemical-induced chromatin remodeling reprograms mouse ESCs to totipotent-like stem cells. Cell Stem Cell. 2022 Mar 3
2. Xin Guan, et al., Nanoparticle-enhanced radiotherapy synergizes with PD-L1 blockade to limit post-surgical cancer recurrence and metastasis. Nature Communication. 2022 May 20
3. Qian-Yue Zhang, et al., Lymphocyte infiltration and thyrocyte destruction are driven by stromal and immune cell components in Hashimoto’s thyroiditis. Nature Communications. 2022 Feb 9
4. Dabbs David J. 診斷免疫組織化學(M). 北京：北京大學醫學出版社，2008.9.
5. 美】Ed Harlow, David Lane. 抗體技術指南(M). 北京：科學出版社，2002:79-80,105.
6. Stack, E. C., et al., Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods, 2014 70 (1): 46-58.
7. 錢幫國. 焦磊. 多標記免疫熒光染色及多普成像技術在組織學研究中的應用. 中國組織化學與細胞化學雜志, 2017 (4): 373-382.