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酵母蛋白表達系統(tǒng)

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安諾倫(北京)生物科技有限公司是一家創(chuàng)辦于2015年的創(chuàng)新型高科技企業(yè),公司由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術(shù)團隊和企業(yè)管理團隊組建而成,專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學(xué)品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。

自公司成立以來一直以“客戶至上”為公司核心價值觀,專注于為生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。本著始終擁有的服務(wù)熱忱,安諾倫生物致力于成長為我國重要的生命科學(xué)試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的前驅(qū)者、致力于成為中國大的科研試劑產(chǎn)品供應(yīng)商之一。

Annoron——是安諾倫生物集科研試劑搜索、采購一體化網(wǎng)站平臺,公司通過建立覆蓋歐美的*,與歐美100多個品牌建立了正式的代理與合作,基本涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,優(yōu)勢更大!

我們的優(yōu)勢:

1,覆蓋歐美的*,總部設(shè)立在美國加州,采購團隊有10多人,能進口涵蓋抗體,蛋白,細胞,血清,耗材等的全門類生物產(chǎn)品。

2,貨品多且全,目前,以我們美國公司為主體,與歐美100多個品牌建立了正式的代理與合作,基本涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質(zhì)量品牌產(chǎn)品,優(yōu)勢更大!

3,現(xiàn)貨庫存,我們已經(jīng)在北京和武漢建立了自營庫存,并將逐步建立上海庫存、成都庫存、廣州庫存,目前涵蓋100個門類,將近10000個現(xiàn)貨產(chǎn)品!

4,期貨提供加急服務(wù),一般2-3周到貨,超過時限加急費全免!

5,價格優(yōu)勢,依托我們一體化的整合優(yōu)勢,我們致力于提供競爭力的價格!

6,優(yōu)質(zhì)的信譽,我們的客戶群包括*,清華大學(xué),北京大學(xué),復(fù)旦大學(xué),南京大學(xué)等100多所大學(xué);康龍化成,昭衍新藥,美迪西,保諾生物,正大天晴等500多家公司!

我們的產(chǎn)品——

抗體類

•       一抗/二抗產(chǎn)品

•       標(biāo)記一抗/二抗相關(guān)產(chǎn)品

•       Elisa試劑盒,配對抗體

•       多種試劑盒,PCR試劑盒,DNA提取試劑盒,RT實時定量試劑盒

蛋白類

•       重組蛋白/天然構(gòu)象蛋白

•       小分子抗原,細胞因子

•       多肽類

分子細胞類

•       腫瘤細胞/傳代細胞/原代細胞

•       定制化的耐藥細胞

•       高品質(zhì)血清

•       常用培養(yǎng)基,分子細胞實驗試劑

•       合成引物/載體/質(zhì)粒

化學(xué)品與試劑

•       化學(xué)中間體

•       化學(xué)合成常用試劑

•       定制中間體合成

•       對照品/標(biāo)準品

•       液相/氣相色譜實驗佐劑

 

歡迎您來電垂詢,我們竭誠為您服務(wù)!

此致敬禮!

 

抗體:

一抗二抗,標(biāo)記抗體,流式抗體,抗體血清

試劑盒:

Elisa試劑盒,PCR試劑盒,基因敲除試劑盒,Real-Time實時定量試劑盒,STR試劑盒

蛋白與多肽:

重組蛋白天然蛋白,多種肽段,多種屬蛋白和抗原(動植物,細菌,病毒等)

細胞產(chǎn)品:

各種細胞株,種屬多元化,細胞類型多樣,腫瘤細胞,干細胞,星狀細胞,傳代細胞,原代細胞等

酶類:

內(nèi)切酶,蛋白酶,核酸酶,聚合酶

克隆/載體:

PCR克隆載體,細菌/病毒克隆載體,多種屬的表達載體

血清/培養(yǎng)基:

細胞實驗常規(guī)培養(yǎng)基,澳洲胎牛血清,北美牛血清,高質(zhì)量細胞實驗相關(guān)試劑

常用試劑:

對照品以及標(biāo)準品,免疫組化常用試劑,免疫印跡常用試劑,常用顯色試劑,細胞生物學(xué)試劑,氣相色譜試劑,液相色譜試劑等

化學(xué)品:

產(chǎn)品(提供結(jié)構(gòu)或者CAS化學(xué)試劑,中間體,訂制化學(xué))

引物/探針:

依據(jù)序列三天支付結(jié)果

脂質(zhì)體:

常規(guī)產(chǎn)品常年現(xiàn)貨

 

 

抗體類,蛋白類,分子細胞類,化學(xué)品與試劑

供貨周期 一個月以上 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)

酵母蛋白表達系統(tǒng)介紹

畢赤酵母(Pichia pastoris)表達系統(tǒng)是近年來發(fā)展迅速、應(yīng)用廣泛的一種真核表達系統(tǒng)。它是甲醇營養(yǎng)型酵母菌,有兩個乙醇氧化酶(Alcohol oxidase, AOX)編碼基因AOX1和AOX2,兩種序列相似,AOX1基因嚴格受甲醇誘導(dǎo)和調(diào)控。當(dāng)甲醇為碳源時,AOX1啟動子可被甲醇誘導(dǎo),啟動乙醇氧化酶的表達,從而用甲醇進行代謝,含AOX1啟動子的質(zhì)粒可用來促進編碼外源蛋白的目的基因的表達。

表達菌株特點

GS115:AOX1和AOX2基因都正常表達AOX蛋白(乙醇氧化酶),甲醇的利用率高,接近于野生型,屬于甲醇快速利用型(Mut+)

KM71:AOX1基因被大部分剔除,只能利用AOX2為AOX編碼,甲醇的利用速率變慢,表現(xiàn)為甲醇慢利用型(Muts)

外源基因的整合方式不同會導(dǎo)致表達菌株的表型不同:

菌株表型

酵母蛋白表達系統(tǒng)常用表達載體及篩選標(biāo)記

載體信息

 

信號肽

對于胞外表達的蛋白除了可以用載體自帶的信號肽,還有以下信號肽可供選擇:

信號肽序列

畢赤酵母表達系統(tǒng)的優(yōu)勢

1. 含有*的強有力的AOX(醇氧化酶基因)啟動子,用甲醇可嚴格地調(diào)控外源基因的表達。

2. 培養(yǎng)成本低,產(chǎn)物易分離,畢赤酵母所用發(fā)酵培養(yǎng)基成本合理,一般碳源為甘油或葡萄糖及甲醇,其余為無機鹽,培養(yǎng)基中不含蛋白,有利于下游產(chǎn)品分離純化。

3. 外源蛋白基因遺傳穩(wěn)定,外源基因能以高拷貝數(shù)整合到畢赤酵母基因組中,不易丟失并能得到高表達菌株。

4. 作為真核表達系統(tǒng),畢赤酵母具有真核生物的亞細胞結(jié)構(gòu),具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻譯后修飾加工功能。

艾柏森生物酵母表達系統(tǒng)的優(yōu)勢

1. 具備完備的畢赤酵母表達平臺,可以根據(jù)蛋白特性或客戶的需求設(shè)計不同的實驗方案;

2. 具有高通量的篩選平臺,可以快速有效的得到好的表達條件;

3. 具有大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)能力

服務(wù)組合

酵母蛋白表達系統(tǒng);Protein Expression in Yeast

經(jīng)典案例

表達載體pPIC3.5K(胞內(nèi)表達),目的蛋白32.49KD(理論值)

表達菌株:GS115/KM71

誘導(dǎo)條件:甲醇濃度0.5%/1%,誘導(dǎo)時間24h/48/72h

結(jié)果分析:從SDS-PAGE膠圖中可以看到,目的蛋白(糖基化后40KDa左右)有明顯表達,其中GS115-5#-24h,0.5%甲醇,GS115-2#-48h,1%甲醇,GS115-3#-48h,01%甲醇,KM71-1#-72h,1%甲醇,都有很明顯的目的條帶,目的蛋白成功表達。

 

酵母蛋白表達系統(tǒng);Protein Expression in Yeast

 

酵母蛋白表達系統(tǒng);Protein Expression in Yeast

 

 

酵母蛋白表達系統(tǒng);Protein Expression in Yeast

 

酵母蛋白表達系統(tǒng);Protein Expression in Yeast



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