TTC染色實驗代測
- 公司名稱 上海信帆生物科技有限公司
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- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/10/26 16:22:14
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TTC染色實驗代測
TTC染色實驗介紹:
TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復合物,1894年*合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶系統的質子受體,與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色,而缺血組織內脫氫酶活性下降,不能反應,故不會產生變化呈蒼白
TTC染色實驗步驟(僅供參考):
1、動物麻醉后立即取材,冷凍PBS從左心室灌注,整個灌注5分鐘內必須完成;
2、入-20℃冰箱中速凍20-30min,便于切片;
3、用手術-刀片或是刮胡刀片切片,厚度2-3mm為宜;
4、將切片置于TTC孵育液中,放入37℃溫箱(不得高于40℃)或是水浴鍋中避光孵育15-30min,隨時觀察,間隔數分鐘翻動組織,使其均勻接觸到染色液;
5、組織成色后,加入固定液終止反應及保存組織,24h后拍照。
染色結果:正常組織呈紅色,梗死區呈蒼白色。
注意事項:
1、標本越新鮮越好,動物麻醉后取材需迅速,勿固定,刀片宜薄而鋒利,在冰箱中速凍的時間以能順利切片為宜,保持切片平整;
2、孵育液提前30min入37℃中水浴或是溫箱中加溫;
3、染色后的標本浸存于10%中性甲醛或是4%多聚甲醛中,染色結果能保存數月,在陽光下易褪色;
4、TTC染色液避光4℃可保存數月,可重復利用2-3次。