應用領域 | 醫療衛生,食品,生物產業,制藥,綜合 |
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逸漠生物真空吸液儀(培養儀器)
一、產品說明
逸漠生物真空吸液儀(培養儀器)
貨號SMP-100
規格425mm x 210mm x 160mm
貨期現貨
供應電源DC 12V 1.5A
大真空度213mbar / 80KPa / 600mmHg
抽液速率17ML/SEC
二、細胞培養操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養箱放置2-4h,以便穩定細胞狀態收到細胞后,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶
傳代方法a、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
c、按6-8 mL/瓶補加培養基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項1.運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。
2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。1.收貨時若發現干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存;
2.為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。
到貨須知1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,干冰運輸的細胞檢查干冰是否揮發,細胞是否解凍,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2.靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
3.由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
備注:客戶在細胞培養過程中,有任何技術問題可以技術服務電話
三、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
四、售后服務
重發標準1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發;
2.收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發;
3.收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發;
4.常溫發貨的細胞靜置 2 小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇 2 天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發;
5.常溫發貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇 2 天后,出現污染,經核實后,重發;
6.細胞活性問題,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發;
7.視具體情況而定。
不予重發1.客戶操作造成細胞污染,不重發;
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發;
3.非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
4.細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前 3 天的細胞狀態照片,不重發;
5.細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發;
6.收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發;
7.視具體情況而定。