DNA 凝膠回收試劑盒
- 公司名稱 安諾倫(北京)生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2023/12/28 16:20:13
- 訪問次數(shù) 1941
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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使用步驟
使用前請先在漂洗液 Buffer PW 中加入 12 mL 無水乙醇。1.將單一的目的 DNA 條帶從瓊脂糖凝膠中切下 (盡量切除多余部分)放入干凈的離心管中,稱取凝膠重量(去除空管重量),100 mg凝膠等同于 100 L體積,作為一個凝膠體積注:若回收的 DNA 片用于克隆,須避免紫外照射損傷 DNA。盡量減少紫外暴露時間。
2.向膠塊中加入 1 倍體積 Buffer PE(如果凝膠重為 0.1g,則加入100 uL Buffer PE)。50-60C水浴溶膠5-10 min,期間溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管,以確保膠塊充分溶解。(若膠塊的體積過大,可事先將膠塊切成碎塊。)
3.將上一步所得溶液加入一個吸附柱中,室溫放置 1min,12,000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。注:吸附的容量為750L,若上步得到的液大于 750L,可分批加入。
4.在吸附柱中加入 300 uL Buffer PE,12,000 rpm 離心 1 min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。
5.在吸附柱中加入 700 uL Bufer PW(確認(rèn)已加入無水乙醇),12,000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。
6.重復(fù)一次步驟 5。
7.吸附柱放回收集管后,12.000 rpm 離心 2 min,盡量除盡漂洗液注意:可將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘,以防止殘留的乙醇影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切PCR等)實驗。
8.將吸附柱放入干凈的 1.5 mL 離心管中,開蓋室溫靜置 5 min。向吸附膜中間位置加入 30 uL Buffer PB 或 ddHO (洗脫液應(yīng)先放置于水浴鍋中預(yù)熱) ,室溫放置 2 min,12,000 rpm 離心2 min,收集DNA 溶液。
注意:洗脫體積不應(yīng)小于30 l,體積過少影回收率。為了提高 DNA 的回收量,可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中,12,000 rpm 離心 2 min,將DNA 液收集到離心管中?;厥沾笥? KB 片,建議 BuflerPB 預(yù)熱至55 C以提升回收效率。DNA 也可以用 ddH0 洗脫。DNA 產(chǎn)應(yīng)保存在-20C以防DNA 降解。