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蛋白酶抑制試劑

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蛋白酶抑制試劑

一般描述

不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制劑片劑可抑制廣泛的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶。與其他cOmplete片劑相比,它們不含EDTA - 不含其他螯合 劑, 例如 EGTA - 保持金屬依賴性蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和功能不受影響。利用IMAC(固相金屬親和色譜)進(jìn)行的多聚His標(biāo)簽融合蛋白親和純化也得到了簡化(無需透析)。
由于優(yōu)化了片劑的成分,它們對絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用,并且非常適合保護(hù)從動物組織、植物、酵母和細(xì)菌中分離的蛋白質(zhì)。不含EDTA的cOmplete片劑同時含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制劑。金屬蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。

不含EDTA的cOmplete片劑與cOmplete片劑相同,區(qū)別是不包含EDTA或其他螯合劑(例如 EGTA)。

特異性

幾種蛋白酶抑制劑的混合物。用于抑制絲氨酸、半胱氨酸,但不用于抑制金屬蛋白酶。

蛋白酶抑制試劑

應(yīng)用

cOmplete,不含EDTA,能有效抑制細(xì)菌、酵母、植物和動物細(xì)胞提取物中的絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶。[1][2][3][4]金屬及天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含EDTA的cOmplete片劑用于抑制大體積(高達(dá)50ml)的蛋白水解活性,其中EDTA可能干擾蛋白質(zhì)穩(wěn)定性(例如,含金屬的蛋白質(zhì))或隨后的檢測。由于EDTA會對IMAC(固相金屬親和色譜)產(chǎn)生干擾,不含EDTA的cOmplete更適合多聚His標(biāo)簽融合蛋白的分離過程。
如需在更小的體積(最高達(dá)10ml)內(nèi)對蛋白酶活性進(jìn)行抑制,我們推薦使用不含EDTA的cOmplete Mini

不含EDTA的cOmplete片劑可按片/50 ml孵育液進(jìn)行添加。用羅氏通用蛋白酶底物(酪蛋白、試鹵靈標(biāo)記的)測定蛋白水解活性。需要在酸性pH范圍內(nèi)提取或單步分離時,只需加入胃蛋白酶抑制劑和不含EDTA的cOmplete片劑,即可確保抑制天冬氨酸(酸性)蛋白酶。所有實驗均在+15至+ 25℃下進(jìn)行。
不含EDTA的cOplete蛋白酶抑制劑混合物已被用作以下試劑的組分
  • 裂解轉(zhuǎn)染人胚腎(HEK293T)細(xì)胞的裂解緩沖液,以及用于斑馬魚胚胎均質(zhì)的放射免疫沉淀測定體系(RIPA)裂解緩沖液[5]

  • 用于海馬組織均質(zhì)的組織蛋白提取試劑(T-PER)[6]

  • 用于肝細(xì)胞裂解的十二烷基硫酸鈉 (SDS)裂解緩沖液[7]

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