GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因 HEK293
- 公司名稱 武漢艾美捷科技有限公司
- 品牌 BPS Bioscience
- 型號
- 產地
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2024/12/26 11:46:51
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
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GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因HEK293細胞系是一種工程化的HEK293細胞系,表達受cAMP反應元件(CRE)控制的螢火蟲熒光素酶和人類GLP-1R(胰高血糖素樣肽1受體;登錄號BC113493)。通過測量熒光素酶活性,可以監測這些細胞中GLP-1R的激活。
GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因HEK293細胞系的功能已通過使用肽類激動劑胰高血糖素樣肽1(7-37)、胰高血糖素樣肽1(7-36)酰胺、Exendin-4、利西那肽、度拉糖肽中的GLP-1部分、塞美格魯肽、曲普瑞肽和Retatrutide的劑量反應實驗進行了驗證。該細胞系還通過使用小分子激動劑Danuglipron的劑量反應實驗進行了驗證。GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因HEK293細胞系對激動劑的響應是通過劑量依賴性方式誘導熒光素酶活性。使用Exendin(9-39)驗證了該細胞系中激動劑誘導的熒光素酶活性的抑制。
背景
GLP-1R是B類家族的G蛋白偶聯受體(GPCRs或分泌素樣受體)的成員,是一種主要在胰島β細胞和腦神經元中發現的跨膜蛋白。GLP-1R由肽類激素胰高血糖素樣肽1(GLP-1)激活,有兩種活性形式,GLP-1(7-37)和GLP-1(7-36)酰胺。GLP-1R在控制血糖水平中發揮重要作用,通過增強葡萄糖刺激的胰島素分泌、葡萄糖、脂質代謝和飽腹感。它在大腦中的作用似乎是控制食欲。
研究工作集中在調節GLP-1R介導的信號通路作為2型糖尿病(T2DM)的治療方法,并導致了幾種GLP-1 FDA批準的激動劑的開發。除了在胰島素分泌中的作用外,GLP-1R激動劑還可以有助于體重管理,降低心血管疾病的潛力,并保護β細胞。正在研究其在T2DM患者腫瘤發展中的作用,但需要進一步的研究來w全理解GLP-1R及其激動劑的功能。
作為BPS Bioscience在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品GLP-1R/CRE 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
GLP-1R/CRE 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系 | BPS-78176 | 查看 |
細胞培養協議
注意:HEK293細胞源自人類材料,因此建議采取適當的安全預防措施。
細胞解凍
1. 在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約60秒。細胞解凍后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速將小瓶的全部內容轉移到含有10 ml預熱的解凍培養基1的試管中。
注意:在37°C水浴中放置細胞過久將導致活性迅速喪失。
2. 立即以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在5 ml預熱的解凍培養基1中重懸。
3. 將重懸的細胞轉移到T25培養瓶中,并在37°C、5% CO2培養箱中培養。
4. 培養24小時后,檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基1,并繼續在37°C、5% CO2培養箱中培養,直到細胞準備好分裂。
5. 細胞應在w全融合前傳代。在s次傳代及后續傳代中,使用生長培養基1A。
細胞傳代
1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。
2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1A并轉移到試管中。
3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在生長培養基1A中重懸。
4. 按照推薦的亞培養比例1:5至1:8,每周一次或兩次將細胞種入新的培養容器中。
細胞冷凍
1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的PBS沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。
2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1A并計數細胞。
3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在4°C冷凍培養基(BPS Bioscience #79796)中重懸,細胞濃度約為2 x 10^6個細胞/ml。
4. 將1 ml的細胞懸浮液分裝到每個冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻,并在-80°C下保存過夜。
5. 次日將小瓶轉移到液氮中長期保存。
注意:建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。
圖. 通過流式細胞儀分析GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因HEK293細胞系表面GLP-1R的表達。
GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因HEK293細胞(綠色)或對照CRE熒光素酶報告基因HEK293細胞(藍色)使用人類GLP-1R PE偶聯抗體(R&D Systems #FAB2814P)染色,并通過流式細胞儀分析。Y軸代表細胞數量百分比。X軸表示PE的強度。
BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商,公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立,從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案,以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學\CRISPR、細胞信號轉導等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因 HEK293 GLP-1R/CRE熒光素酶報告基因 HEK293