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IKCA1 (KCNN4) HEK293 細胞系

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武漢艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc),簡稱艾美捷科技(AmyJet Scientific)。2010年底成立于九省通衢的湖北省武漢市,歷經五年多的發展,已成為國內的集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技生物企業。艾美捷科技總部設在武漢市洪山區光谷大道35號光谷總部二期時代1號樓13層,業務覆蓋全國。


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艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系,目前已成為眾多的中國總代理或一級代理,主要包括:Merck Millipore、Origene、AAT Bioquest、ABGENT、 Cayman Chemical、Abnova 、Biovision、ProSpec、Hycult Biotech 、Equitech-Bio、Trevigen、Alomone Labs、Epigentek、Abbkine、ImmunoReagents 、Jackson、SouthernBiotech、US Biological 、VIVA Bioscience 、Caisson Labs等,可以在*時間為用戶提供Z前沿的專業資訊、完備的產品及物流服務。

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供貨周期 現貨 應用領域 化工,生物產業

IKCA1(KCNN4)HEK293細胞系是表達人類IKCA1的工程化HEK293細胞,也稱為KCNN4(中等電導鈣激活鉀通道蛋白4),IK1,hKCa4和hSK4,Genbank登錄號NM_002250。該細胞系已通過使用膜電位敏感熒光染料(DiBAC4(3))的細胞實驗和西方印跡法對IKCA1表達進行驗證。


背景

IKCA1,也稱為中等電導鈣激活鉀通道蛋白4,IK1,hKCa4和hSK4,是可能的異源四聚體電壓獨立鉀通道的一部分,該通道由細胞內鈣激活。激活后會跟隨膜超極化,促進鈣內流。編碼的蛋白可能是T淋巴細胞中主要的鈣激活鉀通道的一部分,但它也存在于內皮細胞和心臟成纖維細胞中。它們有助于血管平滑肌細胞增殖、遷移和心臟纖維化。在乳腺癌(BC)細胞中發現IKCA1高水平存在,耗竭后導致腫瘤形成減少。IKCA1可以被小分子調節,這些可能在BC和心血管疾病治療中提供z療機會。


作為BPS Bioscience在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品IKCA1 (KCNN4) HEK293 細胞系。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情

IKCA1 (KCNN4) HEK293 細胞系

BPS-90330查看


應用

在研究和藥物發現過程中篩選和驗證IKCA1的激動劑和拮抗劑。


細胞解凍

1. 從液氮儲存中取出一個細胞小瓶。在準備好解凍之前,保持在干冰上。

2. 準備好解凍時,在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約60秒。細胞解凍后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速將小瓶的全部內容轉移到一個空的50毫升錐形管中。

注意:在37°C水浴中放置細胞過久將導致活性迅速喪失。

3. 使用10毫升的血清學移液管,慢慢向含有細胞的錐形管中加入10毫升預熱的解凍培養基1。解凍培養基1應滴加同時輕輕搖晃錐形管,以實現溫和混合并避免滲透沖擊。

4. 立即以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在5毫升預熱的解凍培養基1中重懸。

5. 將重懸的細胞轉移到T25或T75培養瓶中,并在37°C、5% CO2培養箱中培養。

6. 培養24小時后,檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基1,并繼續在37°C、5% CO2培養箱中培養,直到細胞準備好分裂。

7. 細胞應在w全融合前傳代。在s次傳代及后續傳代中,使用生長培養基1B。


細胞傳代

1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1B并轉移到試管中。

3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在生長培養基1B中重懸。

4. 按照推薦的亞培養比例1:10至1:20,每周一次或兩次將細胞種入新的培養容器中。


細胞冷凍

1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的PBS沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1B并計數細胞。

3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在4°C冷凍培養基(BPS Bioscience #79796)中重懸,細胞濃度約為2 x 10^6個細胞/ml。

4. 將1 ml的細胞懸浮液分裝到每個冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻,并在-80°C下保存過夜。

5. 次日將小瓶轉移到液氮中長期保存。

注意:建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。

IKCA1 (KCNN4) HEK293 細胞系

圖1. 離子霉素誘導的細胞內鈣水平增加激活在IKCA1(KCNN4)HEK293細胞系中表達的IKCA1通道。

IKCA1(KCNN4)HEK293細胞和野生型HEK93細胞與DiBAC4(3)預孵化,然后用離子霉素(1 μM)處理。通過測量細胞熒光(λ激發485±10nm,λ發射528±10nm)監測通道激活。結果表明,用離子霉素處理的IKCA1-HEK293細胞由于通道激活引起的超極化而表現出熒光減少。值表示為添加離子霉素后/添加離子霉素前的細胞熒光。


文獻參考:

Ghanshani S., et al., J Biol Chem. 275(47): 37137-37149.

Hoffman J.F., et al., 2003 PNAS 100 (12): 7366-7371.

de-Allie F.A., et al., 1996, Br J Pharmacol. 117(3):479-487.

Terstappen G.C., et al., 2003 Neurosci Lett. 346(1-2):85-88.

Gross D., et al., 2022 Cell Death and Disease 13:902.


BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商,公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立,從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案,以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、CRISPR、細胞信號轉導等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 


作為BPS Bioscience在中國的區域代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務。


IKCA1 (KCNN4) HEK293 細胞系

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