IL-23 STAT3 熒光素酶報告基因HEK293
- 公司名稱 武漢艾美捷科技有限公司
- 品牌 BPS Bioscience
- 型號
- 產地
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2024/12/26 11:56:51
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
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IL-23響應型STAT3熒光素酶報告基因HEK293細胞系是一種工程化的HEK293細胞系,表達受STAT3響應元件控制的螢火蟲熒光素酶,以及人類IL-23受體復合體(IL12Rβ1 NM_005535.3 和 IL23R NM_144701.3)。利用這一細胞系,可以通過測量熒光素酶活性來監測IL-23活性。
IL-23響應型STAT3熒光素酶報告基因HEK293細胞系的功能已通過使用重組人類白細胞介素23(人類IL-23;p19 + p40)的劑量反應實驗、使用抗IL-23抗體烏司他木單抗和古塞庫單抗的抑制實驗,以及Janus激酶抑制劑魯索利替尼的實驗進行了驗證。
背景
IL-23是由p40和p19組成的異源二聚體復合物,是一種由激活的巨噬細胞和樹突狀細胞產生的促炎細胞因子。這種細胞因子通過促進輔助T細胞產生干擾素-γ(IFN-γ)和支持分泌IL-17的CD4+ T細胞的增殖,在免疫反應中發揮著至關重要的作用。由于它涉及多種自身免疫疾病,包括炎癥性腸病(IBD)、結腸炎、銀屑病和關節炎,目前正在大力開發能夠拮抗IL-23信號通路的試劑。
作為BPS Bioscience在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品IL-23 響應型 STAT3 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
IL-23 響應型 STAT3 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系 | BPS-82591 | 查看 |
應用
篩選和表征抗IL-23抗體
細胞解凍
1. 在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約60秒。細胞解凍后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速將小瓶的全部內容轉移到含有10 ml預熱的解凍培養基1的試管中。
注意:在37°C水浴中放置細胞過久將導致活性迅速喪失。
2. 立即以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在5 ml預熱的解凍培養基1中重懸。
3. 將重懸的細胞轉移到T25培養瓶中,并在37°C、5% CO2培養箱中培養。
4. 培養24小時后,檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基1,并繼續在37°C、5% CO2培養箱中培養,直到細胞準備好分裂。
5. 細胞應在w全融合前傳代。在s次傳代及后續傳代中,使用生長培養基1U。
細胞傳代
1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。
2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1U并轉移到試管中。
3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在生長培養基1U中重懸。
4. 按照推薦的亞培養比例1:5至1:8,每周一次或兩次將細胞種入新的培養容器中。
細胞冷凍
1. 抽去培養基,用無Ca2+/Mg2+的PBS沖洗細胞,并用0.05% y酶/EDTA從培養容器中分離細胞。
2. 一旦細胞分離,加入生長培養基1U并計數細胞。
3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘,去除培養基并將細胞在4°C冷凍培養基(BPS Bioscience #79796)中重懸,細胞濃度為1~2 x 10^6個細胞/ml。
4. 將1 ml的細胞懸浮液分裝到每個冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻,并在-80°C下保存過夜。
5. 次日將小瓶轉移到液氮中長期保存。
注意:建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。
圖. 通過流式細胞儀分析IL-23響應型STAT3熒光素酶報告基因HEK293細胞系中IL23R和IL12Rβ1的表達。
IL-23響應型STAT3熒光素酶報告基因HEK293細胞(綠色或粉紅色)或對照STAT3熒光素酶報告基因HEK293細胞(藍色)分別用人類IL12Rβ1 PE偶聯抗體(右圖;R&D系統 #FAB839P)和人類IL23R PE偶聯抗體(左圖;R&D系統 #FAB14001P)進行細胞內染色,并通過流式細胞儀分析。Y軸代表細胞數量百分比。X軸表示PE的強度。
文獻參考:
Yang K., et al., 2021 Am J Clin Dermatol. 22(2): 173-192.
BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商,公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立,從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案,以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、CRISPR、細胞信號轉導等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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IL-23 STAT3 熒光素酶報告基因HEK293IL-23 STAT3 熒光素酶報告基因HEK293