禽類流感H5亞型抗體檢測卡

使用說明書

（膠體金法）

【產品名稱】

通用名：禽類流感H5亞型抗體檢測卡（膠體金法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Avian Influenza Virus H5（GICA）

【包裝規格】 50T/盒

【預期用途】 禽類流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟，是由A型禽類流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）引起的禽類的一種急性、高度致死性傳染病，以急性敗血性死亡到無癥狀帶毒為特征。

本試劑用于檢測禽類血清中禽類流感H5亞型抗體，可用于免疫效果評價、輔助診斷等。

【原    理】

本試劑采用競爭性膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成，對于H5亞型的禽類流感病毒抗體有很好的敏感性。樣本加入到加樣孔后與AIV抗原、膠體金標記物一起沿層析膜移動，若樣本中存在AIV-H5抗體則與膠體金標記物競爭AIV抗原，使檢測線不顯示紫紅色，若樣本中不存在AIV-H5抗體則產生顏色反應。

【試劑盒組成】

【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處（2-30℃），有效期24個月。

【樣本準備】

血清：按常規方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中，靜置約1小時待血液凝固后于4000轉/分鐘離心10分鐘（也可將血液靜置約2小時，待血液凝固自然析出血清），分離血清。要求血清清亮，無溶血、無污染。血清樣本短期可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

【試驗方法】

1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。

2.用配套吸管吸取已準備好的樣本，垂直而緩慢的滴加1滴（約25ul）到加樣孔內。

3.等待10分鐘后用裝有緩沖液的滴瓶滴加兩滴緩沖液到加樣孔。

4.室溫下放置10-15分鐘判斷結果，超過30分鐘的結果無效。

    注意，過量加入樣本或緩沖液會出現錯誤結果。

【結果判斷】

     陰性       陽性       無效       無效

1.陰性：在觀察孔內，檢測線區（T）及對照線區（C）同時出現紫紅色線。意味著抗體水平低于HI滴度1:16。

2.陽性：在觀察孔內，只有對照線區（C）出現一條紫紅色線。意味著抗體水平等于或高于HI滴度1:32。

3.無效：在觀察孔內，對照線區（C）不出現色線。

    本試劑的檢測閾值是HI試驗1:32。所以通過對被檢血清進行倍比稀釋，找到其呈現陽性的最大稀釋倍數，則可以得出抗體滴度。例如：將待檢血清用生理鹽水分別做1:2（一份血清加一份生理鹽水，往后依次類推）、1:4、1:8稀釋，然后將3份不同稀釋倍數樣本分別進行檢測，如1:2、1:4都呈陽性，而1:8呈陰性，則呈現陽性的最大稀釋倍數為1:4，那么此份樣本的最終抗體滴度為2⁵（1:32）乘以2²（1:4）等于2⁷（1:128）。

【試驗結果的解釋】

對于免疫后的樣本，抗體水平的高低反映了免疫效果的高低。對于未經免疫的樣本，陽性結果表明可能有AIV-H5感染，需結合臨床及其他方法進行分析。

【試驗方法的局限性】

    該試驗僅用于檢測AIV-H5抗體水平。

【注意事項】

1.試驗前請仔細閱讀說明書，本產品提供的各種試劑僅供本實驗用。

2.過期或鋁箔袋破損的產品，均不可使用。

3.檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開，打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。

4.去離子水、自來水、生理鹽水不能作為陰性對照。

5.待檢樣本應新鮮清亮，避免使用污染渾濁、嚴重溶血、大量血脂、異常粘稠的樣本。

6.避免接觸檢測卡上加樣孔和檢測窗處的層析膜。

7.試驗的廢棄物應視為污染物，并按當地相關規定妥善處理。

【生產企業】

企業名稱：湖南中檢維康生物技術有限公司