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Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

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北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡稱西美杰)于2006年成立,由留美歸國生物領域專業人士創辦。西美杰堅持自己的經營理念,勤奮踏實地整合全球產品資源與技術資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產企業提供一站式產品服務方案,幫助科研及企業單位縮短科研時間、節約科研成本、提升科研水平、增強企業市場競爭力。

      西美杰以其開放、進取、誠信、專業等優勢與國外多家試劑、原料和技術供應商建立了長期穩定的合作伙伴關系,成為了眾多國際廠商的中國區總代理、一級代理和中國授權代表處。更與藥用輔料生產商長期戰略性合作,共同開展制藥輔料的進口注冊與市場開拓。

      業務的迅猛發展促進了西美杰內部組織架構的不斷優化,針對科研客戶與企業客戶的不同需求,西美杰建立了科研與工業兩支獨立的營銷團隊,分別配備專業的技術支持和客服人員,力求為不同類型的客戶提供前沿專業的解決方案以及產品與高效的服務。

      經過十多年的發展,西美杰得到了眾多客戶的支持與信賴,在業務上實現了迅猛發展,以專業的服務成為多家跨國企業中國區研發與生產基地、制藥企業與診斷企業以及中科院系統、軍科院系統、醫科院系統、清華大學、北京大學、北大醫學部、首都醫科大學等高校與科研院所采購平臺的供貨商。

一、西美杰主營產品線與代理品牌

1. 免疫學:二抗和底物生產商KPL的中國代理;抗體生產商Lifespan,Abnova,Cali-Bio,Mybiosource等近10個品牌的中國一級代理。

2. 分子與細胞生物學:德國生化試劑Panreac-AppliChem、德國核苷酸原料品牌Jena Bioscience等中國總代理;氧化應激檢測Cell Biolabs、轉染試劑專家 Mirus、動物免注射給藥工具Alzet等中國總代理或一級代理。

3. 植物學:美國組培試劑品牌Phytotech中國總代理;植物抗體生產商Agrisera、組培抗菌劑產品PPM供應商PCT中國一級代理。

4. 蛋白結構學:特色蛋白結晶試劑與耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen。

5. 生物制藥:覆蓋制藥從上游到下游環節,全球藥用輔料供應商Pfanstiehl(全球重磅生物藥中7個藥物的輔料供應商)、細胞營養添加物KERRY、歐洲制藥生化原料供應商Panreac-AppliChem,以及HCP/Prot A/BSA殘留檢測試劑盒生產商Cygnus等中國制藥領域代理。

6. 診斷原料:二抗和底物生產商KPL以及自身免疫抗原抗體生產商Arotec中國總代理。

二、西美杰主營產品領域與服務

1. 科研/研發產品及服務項目
研究領域上:覆蓋生物化學、細胞生物學、免疫學、蛋白組學、植物學、分子生物學、藥物篩選;
研究對象上:覆蓋人類、動物與模式動物、植物等物種;
產品結構上:從基因到蛋白質結構與in vivo/in vitro功能的分析和研究;
產品種類上:從試劑到特殊工具和耗材。

2. 生物工業生產原料、藥用輔料
覆蓋培養基生產、生物制藥/疫苗生產細胞營養、無抗生素篩選原核表達系統、HCP/Prot A/BSA殘留檢測試劑盒、檢測抗原/抗體/底物/BSA、診斷工業原料。

3. 技術服務、合約開發與技術轉讓
穩定表達CHO細胞株的構建與工藝開發;
培養基優化;
多肽合成、抗體定制、病毒包裝等;
藥物功能篩選服務KinaseProfiler™等。

4. 代理進口服務
西美杰擁有自主進出口資質,和自有國際物流運輸系統,為中國眾多大型科研機構提供免稅科研儀器和試劑的代理進口服務,我們樂意為客戶代理進口在中國沒有銷售代理的產品。

西美杰將繼續秉承誠信、專業經營之風,整合全球優勢產品資源、技術資源和我公司的服務資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產企業提供一站式的服務。

生化試劑,抗體,試劑盒,耗材,培養基,植物生長調節劑,凝膠

供貨周期 現貨 應用領域 醫療衛生,生物產業,制藥

       Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

近年來,抗體和抗體片段在生物大分子治療和診斷領域備受關注,很多抗體已經步入商業化生產階段。相較于完整的抗體,抗體片段分子量低,組織滲透性好,少有復雜的糖基化結構,可以使用多種原核或真核細胞培養平臺進行表達,已成為很多生物技術公司的研究熱點與完整的抗體不同,很多抗體片段分子結構中沒有Fc端,無法用傳統的Protein A親和層析填料進行捕獲,而Protein L親和層析填料,由于可以結合抗體輕鏈的可變區域,為抗體片段的捕獲提供了可靠的技術手段。但市面上常見的Protein L親和層析填料穩定性普遍較低,填料無法耐受高濃度堿液的清潔,配基脫落嚴重,且價格昂貴,給純化工藝帶來了極大的挑戰。

          FabsorbentTM F1P HFAstrea Bioseparations公司近年來推出的親和層析填料,填料基架粒徑均一的高交聯瓊脂糖,基架上修飾有化學合成的小分子配基,可以高效捕獲各種抗體片段分子。相較于Protein L親和層析填料,FabsorbentTM F1P HF的結合范圍更廣泛,填料可以耐受高達1M NaOH的清潔,其主要優勢特點歸納如下:

  • 結合范圍廣,既可以結合kappa型輕鏈,也可以結合lambda型輕鏈,對一些非人源性的抗體(如鼠源性、牛源性、羊源性等)也有一定的結合能力,可廣泛地用于F(ab)2, Fab, scFv, VL, IgG的捕獲。

  • 小分子化學合成配基,無動物源性,穩定性好,安全性高。

  • 填料可以耐受0.5-1M NaOH的清潔和消毒,清潔效果好,壽命長。

 

應用案例1FabsorbentTM F1P HF捕獲F(ab)2抗體片段

           在該測試案例中,研究人員使用胃蛋白酶將完整的IgG水解為FcF(ab)2片段,并上樣到FabsorbentTM F1P HF層析柱中,工藝參數如下表所示:

層析柱:

CV=10mL

層析填料:

FabsorbentTM F1P HF

流速:

250cm/h

平衡液:

25mM Tris-HCl, pH 8.0

洗脫液:

50mM sodium citrate, pH 3.0

清潔:

0.5M NaOH

 

1的層析圖譜和圖2SDS-PAGE電泳圖譜可以看出,FabsorbentTM F1P HF可以高效捕獲料液中的F(ab)2片段,經洗脫后,得到純度的F(ab)2分子,層析前添加的胃蛋白酶可被有效去除。

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

1FabsorbentTM F1P HF捕獲F(ab)2層析圖譜

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

2SDS-PAGE電泳圖譜Lane 1molecular weight markerLane 2IgG標準品Lane 3是胃蛋白酶水解后料液Lane 4是流穿和淋洗液Lane 5是洗脫液

 

應用案例2FabsorbentTM F1P HF捕獲CHO表達的Fab抗體片段

          在該應用案例中,研究人員使用CHO細胞表達Fab抗體片段,細胞收獲液經澄清后,上樣到FabsorbentTM F1P HF層析柱中,工藝參數如下表所示:

層析柱:

10mm×5cm,CV=4mL

層析填料:

FabsorbentTM F1P HF

流速:

300cm/h,上樣流速50cm/h

平衡液:

50mM sodium phosphate, pH 8.0

上樣:

澄清后的CHO細胞收獲液(含Fab),pH 8.0

洗脫液(測試1)

50mM sodium citrate, pH 3.0

洗脫液(測試2):

50mM sodium acetate, pH 4.0

淋洗液(測試3):

50mM glycine-NaOH, pH 9.0

洗脫液(測試3):

50mM sodium acetate, pH 4.0

清潔:

0.5M NaOH

 

          測試還研究了不同的洗脫工藝條件,測試1采用pH 3.0等度洗脫方式,測試2采用了pH 4.0的等度洗脫方式,測試3先采用pH 9.0的甘氨酸緩沖液進行上樣后的淋洗,隨后用pH 4.0的醋酸鹽緩沖液進行等度洗脫。

          由圖4SDS-PAGE電泳圖譜可以看出,FabsorbentTM F1P HF可以有效捕獲細胞收獲液中的Fab抗體片段。三種洗脫方式均可以確保大于90%的目標Fab純度,且回收率高。其中,在測試2的洗脫條件下,Fab純度和回收率最高。在測試3的條件下,洗脫前使用pH 9.0的甘氨酸緩沖液淋洗能去除少量非特異性結合的雜質蛋白。

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

3FabsorbentTM F1P HF捕獲Fab的層析圖譜(測試2

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

4SDS-PAGE電泳圖譜Lane 1molecular weight markerLane 2純化后的Fab對照品;Lane 3澄清后的CHO細胞收獲液;Lane 4測試1流穿液Lane 5測試洗脫液Lane 6是測試2的流穿液;Lane 7是測試2的洗脫液;Lane 8是測試2的再生液(citrate, pH 3.0);Lane 9是測試3的流穿液;Lane 10是測試3的淋洗液;Lane 11是測試3的洗脫液。

 

應用案例3 FabsorbentTM F1P HF捕獲E.coli表達的VL抗體片段

          在該應用案例中,研究人員使用E.coli表達VL抗體片段經細胞裂解和澄清后,直接上樣到FabsorbentTM F1P HF層析柱中,工藝參數如下表所示:

層析柱:

CV=1mL

層析填料:

FabsorbentTM F1P HF

流速:

保留時間=3min

平衡液:

25mM Tris-HCl, pH 9.0

洗脫液:

50mM sodium citrate, pH 3.0

清潔:

0.5M NaOH

 

          由圖5的層析圖譜和圖6SDS-PAGE電泳圖譜可以看出,FabsorbentTM F1P HF可以有效捕獲復雜料液中的VL抗體片段,大量雜質蛋白在上樣和淋洗過程中被去除,經洗脫后,可以得到高純度的目標分子VL

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

5FabsorbentTM F1P HF捕獲VL的層析圖譜

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

6SDS-PAGE電泳圖譜Lane 1molecular weight markerLane 2是澄清后的E.coli裂解液Lane 3是流穿液Lane 4是淋洗液Lane 5是洗脫液Lane 6是清潔液

 Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

FabsorbentTM F1P HF親和層析填料技術參數

配基:

化學合成的三嗪類配基

基架:

粒徑均一的高交聯瓊脂糖(PuraBead® 6HF)

平均粒徑:

90±10µm

結合載量:

Human Fab: 20mg/ml adsorbent

Human IgG: ≥40mg/ml adsorbent

操作流速:

up to 500cm/h

pH穩定性:

3-13三個月以上的長期測試數據

清潔/消毒:

0.5-1M NaOH, 25℃

保存:

20%乙醇,2-30℃

 

FabsorbentTM F1P HF親和層析填料產品信息

散裝填料

貨號

產品名稱

規格

3904-00025

FabsorbentTM F1P HF

25 mL

3904-00100

FabsorbentTM F1P HF

100 mL

3904-00500

FabsorbentTM F1P HF

500 mL

3904-01000

FabsorbentTM F1P HF

1 L

 

預裝柱

貨號

產品名稱

規格

6632

FabsorbentTM F1P HF Column Kit, 4 x 1 ml

4 x 1 ml預裝柱

6633

FabsorbentTM F1P HF Column Kit, 4 x 5 ml

4 x 5 ml預裝柱

2233

FabsorbentTM F1P HF PuraPlate

96孔板

 

參考資料:

  1. S. Kittler et al., Protein L-more than just an affinity ligand, 2021

  2. Brochure: Purify and capture of antibody fragments with a new synthetic ligand affinity adsorbent FabsorbentTM F1P HF, Astrea Bioseparations

  3. Technical Note: Fab and F(ab’)2 fragment purification from CHO cell culture supernatant using Fabsorbent™ F1P HF, Astrea Bioseparations

  4. Technical User Guide: FabsorbentTM F1P HF, Astrea Bioseparations

 

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學,擁有超過30年層析介質研發和生產經驗,是層析介質產品與服務供應商。目前使用Astrea的產品已有超過21個生產工藝通過了FDA和EMA的批準。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研發和生產基地,專注為生物大分子和CGT領域提供層析介質和技術服務。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術,解決了傳統生物分離工具載量低和工藝耗時問題,實現更快、更環保、更具成本效益的純化過程,符合當今生物治療創新的需求。

 

Fabsorbent™ F1P HF親和層析填料

西美杰是Astrea Bioseparations中國區代理,為用戶提供完善的技術支持與售后服務。北京西美杰是Astrea Bioseparations 授權的中國區代理,為各大科研院所,研究機構、企業等客戶提供高品質產品與服務,也收到廣大客戶的好評。北京西美杰是Astrea Bioseparations 代理,Astrea Bioseparations 中國代理,Astrea Bioseparations 北京代理,Astrea Bioseparations 總代理,Astrea Bioseparations 上海代理,Astrea Bioseparations 全國代理,Astrea Bioseparations 西北代理,Astrea Bioseparations 西南代理,Astrea Bioseparations 東北代理,Astrea Bioseparations 華北代理,Astrea Bioseparations 華南代理,Astrea Bioseparations 華中代理。



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