賽默飛色譜及質譜
離子色譜與質譜聯用高靈敏同時分析19種多組寡糖同分異構體
檢測樣品:超純水 50%氫氧化鈉水溶液 乙腈(色譜純,FisherChemical公司,美國)
檢測項目:19種多組寡糖同分異構體
方案概述:采用Orbitrap靜電場軌道阱質譜QEFocus進行定性和定量分析,ESI源,掃描方式為FullScan-ddMS2。結果表明:該方法對所有目標物均有很好的保留和峰形,四組單、雙糖同分異構體分離效果理想,質譜相比傳統檢測手段具有優異的靈敏度和高選擇性,可以很好的適用于復雜基質中低含量寡糖的分析。
糖類化合物是生命體中最重要的三類生物分子之一,參與了生命特別是多細胞生命的全部時間和空間過程,在細胞之間的識別和互相作用、癌癥的發生和轉移、機體的免疫和免疫抑制、細胞凝集等生物過程中都起著關鍵作用。隨著現代分離分析技術和分子生物學,特別是細胞生物學的飛速進步,不斷揭示出糖類化合物的各種結構和諸多生物學功能。要了解復雜的生命現象,就必須對糖的結構和功能有更深入的了解,糖類化合物的分離分析工作則是糖類結構功能學研究的基礎。
糖類化合物的分離分析是糖學研究的熱點之一,同時具有很大的挑戰性,主要是由于糖類化合物結構的“微觀不均一性”,存在大量的位置異構體和差向異構體,使其分離極其困難。由于寡糖分子的極性非常大,無論在親水型還是正向色譜柱,保留表現都不是很理想,色譜峰形差強人意,并且有較多同分異構體存在時,不能實現較好分離。基于目標物的化學特征,離子色譜對糖類物質有很好的保留和分離效果,相關文獻報道已有很多,一些糖測定標準方法也是使用離子色譜法。相較于傳統的檢測手段,質譜具有高靈敏度、高通量和高選擇性等優勢,被認為是化合物定量的黃金標準,也是在糖類物質檢測中的重要分析方法之一。
因此離子色譜和質譜聯用進行糖類等強極性化合物的分析具有無法比較的優勢,可以解決諸多難題,目前尚屬于較新的應用技術,本實驗則建立了基于IC-QE Focus有效分離分析19種單、雙糖的方法,為食品科學、生物工程、生物樣品中單、雙糖的分離分析提供可靠、前沿的分析方法。
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