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北京西美杰科技有限公司
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西美杰*病毒包裝方案：五大流程，一個對策！
2018-1-24 閱讀(1737)
西美杰*病毒包裝方案：五大流程，一個對策！
不論是細胞治療還是基因治療都離不開病毒載體。目前使用zui多的病毒載體類型包括：腺相關病毒（AAV）、慢病毒（Lv）、逆轉錄病毒（Rv）和腺病毒（Adv）等，這些常用病毒載體特性如下圖所示：
特征 | 慢病毒 | 逆轉錄病毒 | 腺相關病毒 | 腺病毒 |
基因表達 | 穩轉/瞬轉 | 穩轉 | 瞬轉 | 瞬轉 |
是否能感染可分裂的細胞 | 是 | 是 | 是 | 是 |
是否能感染不分裂的細胞 | 是 | 是 | 否 | 否 |
是否能整合到靶細胞基因組 | 是 | 是 | 否 | 否 |
靶細胞的免疫反應 | 低 | 較低 | 非常低 | 高 |
病毒滴度 | +++ | ++ | +++ | ++++ |
轉染效率 | +++ | ++ | +++ | ++++ |
因此在選擇病毒載體時，除了要考慮載體自身特征之外，如何包裝并獲取高滴度高活性的病毒載體對后續實驗至關重要，針對病毒載體制備5大環節，小美為您推薦如下解決方案↓
1. 病毒載體包裝質粒系統
西美杰代理的美國Cell Biolabs公司推出的病毒包裝系統可滿足多種重組病毒包裝需求，包括四大類型病毒包裝質粒AAV Helper Free System、ViraSafe™ Lentivirus Expression Complete Systems、Platinum Retroviral Expression Systems以及RAPAd® Adenoviral Expression Systems等。更多病毒包裝質粒系統介紹請點這里。
2. 病毒包裝試劑
A. 病毒包裝轉染試劑
西美杰代理的美國Mirus公司新推出的病毒包裝轉染試劑TransIT®-VirusGEN™與TransIT®-Lenti系列，專門針對AAV和Lentivirus設計，相比傳統轉染方法能獲得更高的轉染效率和病毒滴度，無動物源成分且兼容多種病毒包裝系統及不同細胞系類型。
品名 | 貨號 | 規格 | 適用病毒類型 |
TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent | MIR 6703 | 0.3/0.75/1.5mL | AAV & Lentivirus |
TransIT®-Lenti Transfection Reagent | MIR 6603 | 0.3/0.75/1.5mL | Lentivirus |
B. Lv/Rv包裝效率增強劑Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up
西美杰*代理的101Bio品牌Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up用于重組慢病毒或逆轉錄病毒包裝過程，可促進病毒基因組轉錄和RNA穩定，使轉染效率提高10倍左右。
品名 | 貨號 | 規格 | 適用病毒類型 |
Lentivirus 10X Titer-Up | P906 | 1 mL | Lentivirus |
Retrovirus 10X Titer-Up | P909 | 1 mL | Retrovirus |
C. AAV/Adv病毒釋放液Virus-High® AAV/ADV Release Solution
西美杰*代理的101Bio品牌Virus-High® AAV/ADV Release Solution是一款無需反復凍融，即可從細胞中快速收獲AAV/Adv病毒以及其他非分泌型無囊膜病毒的試劑。
品名 | 貨號 | 規格 | 適用病毒類型 |
Virus-High® AAV / Adv Release Solution | P900 | 10 mL | AAV & Adv |
3. 快速病毒濃縮試劑與純化試劑盒
西美杰*代理的美國Cali-bio和Cell Biolabs品牌專門針對病毒載體設計的重組病毒濃縮純化試劑（盒），在獲得重組病毒高回收率的同時大大簡化操作流程，無需超速離心設備，是中小規模樣本純化的方案。
重組病毒類型 | 品名 | 貨號 | 特點 |
逆轉錄病毒 | Retrovirus Concentration Solution（5×） | CB300904 | 無需超速離心； |
慢病毒 | Lentivirus Concentration Solution（5×） | CB300905 | |
ViraBind™ Lentivirus Purification Kit | VPK-104 | 操作時間< 2h，無需超速離心； | |
回收率>90%，純化效果與CsCl方法相當 | |||
腺相關病毒 | ViraBind™ AAV Purification Kit | VPK-140 | 適用于純化AAV-2與AAV-DJ； |
ViraBind™ AAV Purification Mega Kit | VPK-141 | 獲得AAV純度>95%，回收率>60% | |
腺病毒 | ViraBind™ Adenovirus Miniprep Kit | VPK-099 | 采用特殊濾膜和離心柱； |
ViraBind™ Adenovirus Purification Kit | VPK-100 | 回收率>90%，純化效果與CsCl方法相當 |
4. 病毒滴度檢測試劑盒
測定重組病毒滴度是提高下游實驗可控性，重復性和準確性的前提，西美杰代理的Cell Biolabs品牌針對不同病毒載體的特性分別設計的了多種滴度測定試劑盒，并且兼容了和的測定方法。
重組病毒類型 | 品名 | 貨號 | 特點 |
慢病毒 | Lentivirus Rapid Quantitation Kit | VPK-112 | 快速定量，操作過程45-60min； |
Lentivirus-Associated p24 ELISA Kit | VPK-107 | Pull-down技術分離出病毒相關P24蛋白，去除游離P24蛋白； | |
Traditional p24 ELISA Kit | VPK-108-H | ELISA方法檢測總P24蛋白定量慢病毒滴度 | |
逆轉錄病毒 | QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit | VPK-120 | 快速定量，操作過程45-60min； |
腺相關病毒 | QuickTiter™ AAV Quantitation Kit | VPK-145 | 快速定量，操作過程<2h； |
腺病毒 | QuickTiter™ Adenovirus Quantitation Kit | VPK-106 | 快速定量，操作過程45-60min； |
QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit | VPK-109 | 無需空斑形成實驗，避免復雜的鋪瓊脂步驟，操作更簡便； | |
QuickTiter™ Adenovirus Titer ELISA Kit | VPK-110 | 可用于所有41個血清型的腺病毒 |
5. 病毒感染增強試劑
西美杰代理的Cell Biolabs品牌還針對不同病毒載體研發了促病毒感染試劑，能顯著提高病毒對靶細胞的感染，進而提高基因表達效率。
品名 | 貨號 | 規格 | 特點 |
ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit | LTV-200 | 40 次 | 復合型試劑能與慢病毒或逆轉率病毒形成復合物，與Polybrene®相比病毒感染效率可提高2-6倍，適用于原代細胞和干細胞 |
LTV-201 | 200次 | ||
ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit | RV-200 | 40次 | |
RV-201 | 200次 | ||
ViraDuctin™ AAV Transduction Kit | AAV-200 | 10次 | 有效提高重組AAV在多種細胞內的轉染效率，包括傳統方法轉導效率低的細胞和非分裂細胞，如原代細胞和干細胞。該試劑使用方便，僅需2h，是AAV轉染非分裂細胞的。 |
AAV-201 | 50次 | ||
ViraDuctin™ Adenovirus Transduction Reagent | AD-200 | 10次 | 該試劑讓重組腺病毒感染不依賴于細胞的CAR（柯薩奇病毒-腺病毒受體）水平，可顯著提高病毒感染低CAR或無CAR表達的細胞，如原代細胞或干細胞，還可提高轉入基因的表達效率 |
AD-201 | 50次 |
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