北京西美杰科技有限公司
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- 更新時間:
- 2024-10-16 21:00:07
- 有效期:
- 2024年10月16日--2025年4月16日
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轉染江湖風起云涌,群雄紛爭不斷。近年來,病毒載體在基因/細胞治療領域的廣泛應用,讓市場對病毒包裝的質量和效率要求日益提升。Mirus經歷兩年,專攻AAV與Lentivirus病毒載體包裝制備的新產品TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent終于問世,與各路轉染高手過招,精彩紛呈。欲知詳情,且看下文分解。
1.TransIT®-VirusGEN™招式解析
TransIT®-VirusGEN™ 依然采用Mirus多聚物轉染方法,無動物源成分,主要針對腺相關病毒(AAV)包裝而研發,對部分慢病毒(Lentivirus)包裝系統也有很強優勢,這兩種病毒都需要HEK 293細胞系生產,所以該轉染試劑適用于包括懸浮和貼壁的各種類型HEK 293細胞系,能大幅提高轉染效率和病毒產量,從而在有限的時間和資源里實現zui大收獲。
2.AAV包裝實戰分析
在相同培養條件下,用不同轉染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細胞系共轉pAAV-hrGFP, pAAV-RC, and pAAV-Helper三種質粒包裝AAV重組病毒,然后利用GFP標簽在HT1080細胞上檢測AAV滴度。結果顯示,不論是懸浮還是貼壁293細胞系,采用TransIT®-VirusGEN™轉染產出的AAV滴度遠遠高于其他幾款轉染試劑。
3.慢病毒包裝實戰分析
在相同培養條件下,用不同轉染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細胞系轉染pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ 穿梭質粒 和慢病毒包裝質粒Mix powered(MISSION®)包裝Lentivirus重組病毒,然后利用GFP標簽在293T/17細胞上檢測Lentivirus滴度。結果顯示,不論是懸浮還是貼壁293細胞系,采用TransIT®-VirusGEN™轉染產出的重組慢病毒滴度都遠遠高于其他幾款轉染試劑。
4.轉染體系放大可提高AAV產量
采用TransIT®-VirusGEN™在6孔板和250mL培養瓶中轉染293-F懸浮細胞系包裝AAV,在6孔板和10cm平皿中轉染293T/17貼壁細胞系包裝AAV,兩組實驗在不同大小培養體系產出的重組病毒滴度比較結果顯示,當體系從6孔板→250mL培養瓶(或6孔板→10cm平皿)放大后,病毒產量也會相應提升20%左右,表明該轉染試劑適用于包裝重組病毒的工藝放大。
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