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北京西美杰科技有限公司
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- 2024-07-19 16:15:27
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- 2024年7月19日--2025年7月19日
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安全低毒高質量的新型MIDORIGreen核酸染料
核酸染料是分子生物學實驗中重要試劑，其中溴化乙錠(EtBr)因其高靈敏度，長期以來一直被用作核酸染色的標準染料。但是EtBr具有潛在的誘變和致癌作用，EtBr能與DNA嵌合，引起細胞突變，長期接觸可能對人體健康產生負面影響。NIPPON GENETICS推出的新型MIDORIGreen系列核酸染料，是一種非致癌性和非致突變性的染料，無法穿透乳膠手套和細胞膜。同時致突變性試驗（Ames試驗）和細胞毒性試驗均為陰性，因此是一種高安全度的核酸染料[1]。
紫外光與EtBr染色至今仍一起被用于分子生物學實驗室中檢測核酸。然而紫外光譜會導致DNA樣品的修飾和降解，30秒的紫外線曝光足以大幅降低克隆效率。藍/綠LED在470 nm - 520 nm處發出安全可見光，這種光譜對 DNA 沒有破壞性，與紫外光相比，DNA完整性和克隆/測序效率不受影響，即使在長時間的光照下也是如此。MIDORIGreen系列核酸染料經過優化，可在紫外光或藍/綠光激發時獲得更亮的信號，同時也兼容紫外光。
圖1：EtBr和MIDORIGreen吸收光譜對比
MIDORIGreen產品特點
? 出色的信號質量
? 用于凝膠內染色和后染色的安全核酸染料
? 溴化乙錠的安全替代品：非致癌無毒
? 適用dsDNA、ssDNA或RNA染色
? 膠染法和泡染法均可
安全低毒高質量的新型MIDORIGreen核酸染料
MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance靈敏度與EtBr相當，可以直接添加到熔融的瓊脂糖中。同時兼容紫外線或藍/綠LED，因此無需更改原有的實驗步驟。MIDORIGreen Advance的稀釋倍數可高達1：25000。100 mL瓊脂糖凝膠只需4μL至6μL，每1mL的染料可配置約17L至25L瓊脂糖凝膠。
MIDORIGreen Direct
MIDORIGreen Direct中已經包含10X Loading Buffer，可以直接添加到核酸樣品中，無需將其或任何其他染料添加到凝膠基質。相較于在凝膠中添加染料的染色方式，核酸的直接染色消除了背景染色，提供良好的信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct足夠提供1,000至2,000個樣品的染色。
MIDORIGreen Direct可以為下游提供更好的結果。
從瓊脂糖凝膠中分離核酸可以進一步下游應用，許多染料，如EtBr甚至SYBR™ Green，由于其嵌入特性，都是強酶抑制劑。而MIDORI Green 染料與 DNA 骨架結合的方式能為下游應用帶來更高的效率，包括克隆、測序、PCR等。[2]
MIDORIGreen Xtra是NIPPON GENETIC最新一代核酸染料，針對藍/綠LED和藍LED光源進行了優化，可以在瓊脂糖凝膠中產生強熒光信號。同時MIDORIGreen Xtra不會對瓊脂糖凝膠進行染色，因而具有很低的背景噪音，從而獲得出色的信噪比。由于非常低的背景熒光，這使得識別少量 DNA 變得非常容易，因此MIDORIGreen Xtra具有超高靈敏度。
圖3：使用MIDORI Green Xtra檢測的DNA條帶具有超高靈敏度（注：左圖使用藍色/綠色 LED 透射儀進行檢測；右圖使用藍色LED透射儀進行檢測。）
MIDORIGreen easy 
MIDORIGreen easy具有與MIDORIGreen Xtra相同的出色信號質量和低背景，擁有比EtBr更好的信號，MIDORIGreen easy的開發是為了可以輕松替換SYBR®safe，同時染色方案不需要改變。MIDORIGreen Easy的稀釋倍數可高達1：10000，100 mL瓊脂糖凝膠只需8μL至10μL。
圖4：MIDORIGreen easy（左）與MIDORIGreen Xtra（右）使用藍/綠 LED 激發燈。
MIDORIGreen系列檢測光譜與靈敏度
產品 | 藍/綠LED | 藍LED | UV-Light | 靈敏度 |
MIDORIGreen Advance | √ | √ | ? | + |
MIDORIGreen Direct | √ | √ | ? | + + |
MIDORIGreen Xtra | √ | √ | ? | + + + |
MIDORIGreen Easy | √ | √ | √ | + + |
注: √表示兼容；?表示兼容但不推薦；
MIDORIGreen核酸染料系列產品列表
貨號 | 品名 | 規格 |
MG04 | MIDORIGreen Advance | |
MG06 | MIDORIGreen Direct (含loading buffer) | 1 ml (10x conc. -可直接添加樣品) |
MG10 | MIDORIGreen Xtra | 1 ml (25.000x -可染色25L凝膠) |
MG12 | MIDORIGreen Easy | 0.4 ml (10.000x -可染色4L凝膠) |
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