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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>其它系列>> BC3120-50T/24S植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒 其它

植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒 其它
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參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 BC3120-50T/24S
  • 廠商性質 生產商
  • 產品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-07-29 20:15:05瀏覽次數:996評價

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現貨 規格 50T/24S
貨號 BC3120 應用領域 環保,化工,生物產業,農業,綜合
主要用途 植物脫氫酶(PDHA)活性檢測
儲存條件
2-8℃
中文名稱
植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒 其它
有效期
6個月
單位

英文名稱
Plant Dehydrogenase(PDHA) Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

植物脫氫酶(PDHA)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號: BC3120
規格: 50T/24S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱規格保存條件
試劑一粉劑×22-8℃保存
試劑二液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體100 mL×1瓶 (自備)2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑一:使用前加少量水溶解,定容至30 mL,避光、4℃保存(盡量現配現用);

  2. 試劑三:自備乙酸乙酯。提供一60mL棕色試劑瓶。

產品說明:
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態,能直接表示生物細胞對其基質降解能力的強弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,即TTC)在細胞呼吸過程中接受氫以后,其還原產物三苯基甲替(Triphenyl Formazone,即TFF)呈現紅色,在波長485nm處有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm測定其吸光值,即得植物脫氫酶活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、冰、研缽/勻漿器、蒸餾水、乙酸乙酯(不允許快遞,請用戶自備)。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
稱取0.1g的植物組織,用雙蒸水清洗3-4次,用濾紙吸干水分,備用。
二、測定步驟

  1. 可見分光光度計預熱30min以上,調節波長至485nm乙酸乙酯調零。

  2. 操作表:取5mLEP管依次加入

加入試劑對照管測定管
樣本(g)0.10.1
試劑一(mL)-1
試劑二(mL)21
充分混勻,37℃,暗培養3h,取出后立即冰浴5min,去濾液,盡量用濾紙吸干樣本,置于研缽/勻漿器中。
試劑三(mL)11
充分研磨(建議在通風櫥操作)后全部移至離心管中,用少量試劑三沖洗研缽,一起加入離心管,用試劑三定容至2mL,10000rpm/min4,離心5min,取上清,測定485nm下的吸光值。計算ΔA=A測定-A對照。


三、脫氫酶活力計算
酶活單位定義:在37時,每小時每克組織樣本使反應體系吸光值每增加0.01為一個酶活單位。
脫氫酶活性(U/g/h)=ΔA÷0.01÷T÷W=33×ΔA÷W
T:反應時間,3hW:樣本質量,g
注意事項:

  1. 配制好的試劑一避光保存于4,盡量在一周內使用,若出現紅色,則不能使用。

  2. 試劑三易揮發,有毒,為了您的健康,請穿實驗服,戴口罩,戴乳膠手套操作。

  3. 反應完成后立即冰浴以終止反應,并去除干凈殘留的反應液。

  4. 如果測定出來的吸光值較大,需把樣本適當稀釋再進行測定,注意計算公式乘以稀釋倍數。

實驗實例:

  1. 稱取1g蘆薈葉片,用雙蒸水清洗3-4次,用濾紙吸干水分,按照測定步驟進行操作,測得計算ΔA=A測定-A對照=0.120-0.012=0.108,計算酶活得:

脫氫酶活性(U/g/h)=33×ΔA÷W=3.5964 U/g/h
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