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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性檢測試劑盒說明書



可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4000
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入4 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑-20℃分裝保存4周；

2. 標準品：5 mmol/L的對硝基 苯* 溶液。

產品說明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶體中的一種酸性水解酶。其活性變化與機體某些病理狀態密切相關。
S-NAG分解對硝基 苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基 苯*，后者在400nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。


注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
當ΔA大于1時，建議將上清液稀釋后進行測定；當ΔA小于0.02時，建議延長反應時間。計算公式中注意乘以稀釋倍數或注意反應時間變化。
實驗實例：

1. 取兩管0.1g三葉草土，即為測定管和對照管，按照測定步驟操作，記為A測定管、A對照管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.509-0.434=0.075，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.604-0.002=0.602，計算酶活得：S-NAG活力（U/g 土樣）=1.44×ΔA測定÷ΔA標準÷W=1.44×0.075÷0.602÷0.1=1.79402 U/g 土樣。

2. 取兩管0.1g林土樣，即為測定管和對照管，按照測定步驟操作，記為A測定管、A對照管。計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.574-0.497=0.077，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.604-0.002=0.602，計算酶活得：S-NAG活力（U/g 土樣）=1.44×ΔA測定÷ΔA標準÷W=1.44×0.077÷0.602÷0.1=1.84186 U/g 土樣。

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