目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>其它系列>> BC4360-50T/48S草酸含量檢測試劑盒 其它
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/48S |
貨號 | BC4360 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,綜合 |
主要用途 | 草酸含量檢測 |
草酸含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號: BC4360
規格: 50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
2、 標準品:臨用前加入792µL蒸餾水配制成100 µmol/mL草酸標準溶液;
產品說明:
草酸是一種二元羧酸,廣泛存在于植物界中,且在不同領域有著不同的作用:在醫藥、印染、塑料等工業生產中,草酸可用作制藥原料、絡合劑、漂白劑、沉淀劑以及還原劑等;從食品角度看,長期食用草酸含量高的蔬菜,容易引發關節炎、低血鈣、膀胱結石和腎結石等疾病,而被認為是礦物元素的拮抗物。
Fe3+在pH為2的條件下可以與磺基水楊酸生成紫色絡合物,在510 nm處有特征吸收峰。草酸及草酸根可以使Fe3+與磺基水楊酸的紫色絡合物顏色變淺,且Fe3+與磺基水楊酸絡合物的吸光度隨著草酸量的增加而降低,據此可由降低的吸光值計算出樣本中草酸的含量。
低檢出限:0.0982 μmol/mL
線性范圍:0.75-25 μmol/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、1 mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水、EP管。
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
組織:按照質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1 g,加入1 mL蒸餾水)充分勻漿,然后加入少許試劑四(約3-5mg),震蕩混勻后置于75℃水浴鍋脫色30 min,期間搖晃2-3次,脫色后常溫3000 r/min離心15 min,取上清置于冰上待測(若組織沉淀與試劑四不能離心去除時,建議將上清多離心幾次;
若一次脫色不全時,建議重復脫色至溶液呈無色或略呈乳白色)。
1、 分光光度計預熱30 min以上,調節波長至510 nm,蒸餾水調零。
2、 將100 µmol/mL的草酸標準液用蒸餾水稀釋為25、20、15、12、6、3、1.5、0.75µmol/mL的標準溶液備用。
試劑名稱(µL) | 空白管 | 測定管 | 標準管 |
試劑一 | 50 | 50 | 50 |
試劑二 | 375 | 375 | 375 |
試劑三 | 25 | 25 | 25 |
蒸餾水 | 50 | - | |
樣本 | - | 50 | - |
標準溶液 | - | - | 50 |
蒸餾水 | 500 | 500 | 500 |
混勻,室溫靜置20 min | |||
于1 mL玻璃比色皿中測定510 nm處吸光值A,分別記為A空白管、A測定管、A標準管。計算ΔA=A空白管-A測定管,ΔA標準=A空白管-A標準管。同一批檢測樣本需測1-2個空白管(標準管只需檢測1-2次)。 |
注意:如果檢測樣本量大,可以根據樣本所需按照試劑一:試劑二:試劑三=2:15:1(v:v:v)的比例配制成工作液現配現用,加樣體系為450 µL工作液,50 µL樣本(蒸餾水或標準溶液),500 µL蒸餾水。
三、草酸含量計算
1、 標準曲線的繪制:
以各個標準溶液的濃度為x軸,其對應的ΔA標準為y軸,繪制標準曲線,得到標準方程y= kx+b,將ΔA帶入方程得到x(µmol/mL)。
2、 草酸含量的計算:
草酸含量(mg/g質量)= x×V提取×M×10-3÷W=0.09x÷W
V提取:加入的蒸餾水體積,1mL;W:樣本質量,g;M:草酸分子質量90.04;10-3:單位換算系數,1 µg=10-3 mg。
注意事項:
1. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
2. 如將試劑一、試劑二與試劑三配成工作液使用時,按照配制比例根據樣本量所需現配現用,不得一次性配完待用。
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