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尿素氮（BUN）含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC1530

規格：50T/24S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑一：臨用前加5 mL蒸餾水充分溶解，現用現配，4℃可保存一周。

2、 試劑三：臨用前將A液倒入B液中混合，或者根據比例（A:B=1:4）現用現配。

3、 標準品：10 mg尿素。臨用前加入4.66 mL蒸餾水配制成1 mg/mL尿素氮標準液。

產品說明：

尿素（BUN）是人體蛋白質代謝的主要終末產物，BUN構成了血液中絕大部分的非蛋白質氮，血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH₃-N，生成的藍色靛酚和尿素氮的濃度成正比。

技術指標：

最檢出限：0.000086 μg/mL

線性范圍：0.390625-50 μg/mL

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）

組織：按照質量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5-10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水），冰上勻漿后于4℃，12000g離心15min，取上清待測。

細菌或細胞：按照細胞數量（10⁴個）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1的比例（建議500萬個細胞加入1mL蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3s，間隔7s，總時間3min）；然后4℃，12000g離心15min，取上清置于冰上待測。

血清（漿）或其它液體：直接檢測。

二、測定步驟

1. 分光光度計預熱30min，波長調至630nm，蒸餾水調零。

2. 將1mg/mL尿素氮標準液用蒸餾水稀釋至25μg/mL備用。

3. 加樣表：

三、計算公式

1. 按樣本質量計算：

尿素氮含量（μg/g 質量）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷W=25×ΔA測定÷ΔA標準÷W

2. 按蛋白濃度計算：

尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷（Cpr×V提取）=25×ΔA測定÷ΔA標準÷Cpr

3. 按細胞數計算：

尿素氮含量（μg/10⁴ cell）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品×V提取÷細胞數量=25×ΔA測定÷ΔA標準÷細胞數量

4. 按液體體積計算：

尿素氮含量（μg/mL）=ΔA測定÷ΔA標準×C標準品=25×ΔA測定÷ΔA標準

C標準品：標準品濃度，25μg/mL；V提取：提取液體積，1mL；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；細胞數量：以萬計。

注意事項：

如果樣本吸光值大于1.3，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進行測定。

相關發表文獻：

[1] Xiaoguang Zhu,Jun Shi,Huicong li,et al. PVT1 knockdown alleviates vancomycin-induced acute kidney injury by targeting miR-124 via inactivation of NF-κB signaling. RSC advances. September 2018;(IF3.049)

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