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谷*酰胺酶（GLS）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1450
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液：若試劑有結晶析出，可40℃加熱或者超聲溶解。試劑一：臨用前加入10 mL提取液充分溶解待用；

2. 試劑二B：臨用前將試劑二A倒入試劑二B中混勻（A:B=1：4比例），2-8℃保存4周；或者根據樣本量，按照體積比試劑二A：試劑二B=1:4現配現用；

3. 標準品：10 μmol/mL氮標準液。

4. 0.3125μmol/mL標準溶液的制備：臨用前取25μL 10μmol/mL氮標準液和775μL提取液混合得0.3125μmol/mL的標準溶液備用。

產品說明：
谷*酰胺酶（L-glutamine amidohydrolase，EC3.5.1.2）主要存在于高等動物和某些細菌以及植物根中，催化谷*酰胺水解成谷*和氨，在氮素代謝中具有重要調控作用，尤其是調節游離氨含量和尿素代謝。
本試劑盒利用靛酚藍比色法測定GLS催化谷*酰胺生成的氨來計算其酶活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、臺式離心機、水浴鍋、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和雙蒸水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項：

1. 當ΔA大于0.7時，建議將上清液用提取液進一步稀釋后測量，計算時乘以稀釋倍數。

2. 試劑二配置后盡快使用，若發現變色則不能再用。

相關發表文獻：

1. Fu Y, Lei F, Wang J, et al. Maternal Cigarette Smoke Exposure Disturbs Glutamate/GABA Balance in pFRG of Neonatal Rats[J]. Respiratory Physiology & Neurobiology, 2020: 103383.

2. Liu S, Li N, Lin Q, et al. Glutaminase 1 in mandarin fish Siniperca chuatsi: Molecular characterization, expression pattern and function involving in virus replication[J]. Aquaculture, 2020: 734924.

參考文獻：

1. Mahajan R V, Saran S, Kameswaran K, et al. Efficient production of L-asparaginase from Bacillus licheniformis with low-glutaminase activity: optimization, scale up and acrylamide degradation studies[J]. Bioresource technology, 2012, 125: 11-16.

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