目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>土壤系列>> BC5090-50T/48S土壤游離氨基酸含量檢測試劑盒 土壤
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/48S |
貨號 | BC5090 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,綜合 |
主要用途 | 土壤游離氨基酸(S-FAA)含量檢測 |
土壤游離氨基酸(S-FAA)含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號:BC5090
規格:50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體30mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 試劑四:臨用前取1瓶加2 mL蒸餾水,充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存2周;
2、 標準品:10 mg半胱*酸。臨用前加入4.13 mL蒸餾水,得到20 μmol/mL的半胱*酸標準溶液備用,用不完的試劑可以2-8℃保存4周。
產品說明:
作為土壤中一類重要的化合物,氨基酸占土壤中全氮的15%-60%,是土壤氮素循環和植物養分供給過程中重要的“庫"和“源",可通過礦化作用滿足作物氮素營養的需求,也可以被植物直接吸收利用。另外,氨基酸也是土壤微生物重要的氮源,對于土壤微生物群落結構、數量和活性均有直接影響。因此,研究土壤中氨基酸含量變化規律,對研究土壤氮素循環,及其對植物生理生態變化的影響均有重要意義。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應在570nm有特征吸收峰;通過測定570nm吸光度,來計算氨基酸含量。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋/金屬浴、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽、30-50目篩、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
土樣37℃/自然風干后過30-50目篩,稱取約0.15g土樣,加試劑一1mL,振蕩2h,10000rpm離心10min,取上清液,待測。
二、測定步驟
1. 分光光度計預熱30min以上,調節波長至570nm,蒸餾水調零。
2. 標準品稀釋:取40μL 20μmol/mL 標準液加入160μL蒸餾水得4μmol/mL標準溶液進行實驗。
3. 操作表:(在EP管中進行)
試劑名稱(μL) | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本 | 200 | - | - |
標準品 | - | 200 | - |
蒸餾水 | - | - | 200 |
試劑二 | 500 | 500 | 500 |
試劑三 | 500 | 500 | 500 |
試劑四 | 50 | 50 | 50 |
混勻后蓋緊(纏封口膜防止水分散失),100℃反應15min,冷卻后反復顛倒EP管數次,將測定管8000rpm離心5min后取上清,于570nm測定吸光值,分別記為A測定管、A標準管、A空白管,并計算ΔA測定管=A測定管-A空白管,ΔA標準管=A標準管-A空白管。顯色后務必在30min內測完。
標準管、空白管只需做1-2次。
三、S-FAA含量計算
S-FAA含量(μmol/g 土樣)=(C標準品×V標準品×ΔA測定管÷ΔA標準管)÷(V樣÷V樣總×W)
=4×ΔA測定管÷ΔA標準管÷W
C標準品:標準品濃度,4μmol/mL;V標準品:反應體系中加入標準品體積,0.2mL;W:土樣質量,g;V樣:反應體系中加入樣本體積,0.2mL;V樣總:樣本總體積,1mL。
注意事項:
1、 試劑四需臨用前配制,且避光保存。
2、 脯*酸和羥脯*酸與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
3、 如果ΔA測定管大于1,建議將樣本用試劑一稀釋后進行測定。
實驗實例:
1、 取0.15g土樣加入1mL試劑一進行樣本處理,取上清后按照測定步驟操作,使用1mL玻璃比色皿測得A測定管=0.645、A標準管=0.745、A空白管=0.052,計算ΔA測定管=A測定管-A空白管=0.645-0.052=0.593,ΔA標準管=A標準管-A空白管=0.745-0.052=0.693,按樣本質量計算含量得:
S-FAA(μmol/g土樣)=4×ΔA測定管÷ΔA標準管÷W=4×0.593÷0.693 ÷0.15=22.819 μmol/g 土樣。
參考文獻:
[1] Wang X, Cui X Y, Guo Y F A study on free amino acid in different forest types soil of cold-temperate forest region[J]. Journal of Nanjing Forestry University (Natural Science Edition), 2016, 59(04): 42-48.
[2] Wang B, Jiang Y Y, Jiao J G, et al. Effects of earthworm on constituent and amount of amino acid in soil[J]. Acta Ecologica Sinica, 2015,35(14):4816-4823.
[3] Zhang X J, Wang W Y, Li W Q, et al. Dynamics of soil dissolved organic nitrogen in alpine meadow[J]. Journal of Lanzhou University: Natural Sciences, 2016, 52(5):623-627.
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