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土壤無機磷（S-PHOS）含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2885
規格：100T/96S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑三：臨用前加入4 mL蒸餾水溶解，2-8℃可以保存4周；

2. 試劑四：臨用前加入4 mL蒸餾水溶解，2-8℃可以保存4周；

3. 定磷試劑的配制：臨用前按試劑二：試劑三：試劑四=1:1:1的體積比配制。配好的定磷試劑應為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，限當天使用。配制過程中，可能會產生黑色固體，其不影響結果，注意吸取時不要將黑色固體吸入。（注意：配制時最好使用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿，以避免磷污染。）

4. 標準品：10 μmol/mL磷標準液。

產品說明：  
磷是植物必需大量元素。植物主要通過根系從土壤中獲取磷元素。土壤磷包括有機磷和無機磷。土壤有機磷經過礦化分解而轉化為無機磷，才能進一步被植物吸收利用。
從土壤中提取無機磷，在酸性環境中，通過鉬藍法定磷，即可計算出無機磷含量。
技術指標：
低檢出限：0.015 µmol/mL
線性范圍：0.0323-6.0 µmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、可調式水浴鍋，分析天平、可調式移液器、研缽、蒸餾水和30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
取10mL離心管，加入稱取的30-50目篩子過篩的風干土樣約0.01g，加入1mL試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴浸提1h，8000rpm，室溫，離心10min，取上清液，待測。
二、測定步驟

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min以上，調節波長到660 nm，蒸餾水調零。

2. 1μmol/mL 標準溶液的配制：取100μL 10 μmol/mL磷標準液，加入900μL蒸餾水，充分混勻，配制成1 μmol/mL標準液使用，現用現配。

3. 打開水浴鍋，調節溫度到40℃。

4. 空白管：取EP管，依次加入100μL蒸餾水，100μL定磷試劑，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度，記為A空白管。空白管只需做1-2次。

5. 標準管：取EP管，依次加入10μL標準液，90μL蒸餾水，100μL定磷試劑，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度，記為A標準管。標準管只需做1-2次。

6. 測定管：取EP管，依次加入10μL上清液，90μL蒸餾水，100μL定磷試劑，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測定吸光度，記為A測定管。

注意事項：

1. 如果吸光值大于1.5時，樣本需用蒸餾水做相應稀釋。

2. 需在40min內完成比色。

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