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1964次土壤過氧化氫酶檢測試劑盒說明書
貨號:YJS2222
規格:50T/24S
S-CAT 是土壤微生物代謝的重要酶類,在 H2O2 清除系統中具有重要作用。
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰,通過測定與土壤反應后溶液在此波長下吸光度的變化,即可反應 S-CAT 活性的高低。
紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑一:液體×5 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 9.9mL 蒸餾水充分溶解后待用。用不完的試劑 4℃保存。試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 2mL 蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑 4℃保存。
試劑三:液體×1 瓶,4℃保存。
試劑名稱 | 測定管 | 無基質管 | 無土管 |
風干土樣(g) | 0.1 | 0.1 |
|
試劑一(μl) | 1000 |
| 1000 |
雙蒸水(μl) |
| 1000 |
|
25℃振蕩培養 20min | |||
試劑二(μl) | 25 | 25 | 25 |
混勻 8000g,常溫離心 5min,取全部上清 | |||
試劑三(μl) | 120 | 120 | 120 |
混勻,用蒸餾水調零,240nm 處記錄各管 A 值。
每個測定管要設一個無基質管,無土管只要做一管。
單位的定義:每天每 g 風干土樣催化 1μmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。
計算公式:S-CAT(U/g)=[(A 無土管-A 測定管+A 無基質管)×V 反總÷(ε×d)×106]÷W÷T
=18.9×(A 無土管-A 測定管+A 無基質管)
V 反總:反應體系總體積,1.145×10-3L;ε:過氧化氫摩爾消光系數,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;
T:反應時間,20min=1/72d;W:樣本質量,0.1g。
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