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大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號F02306

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所在地上海市

更新時間:2016-07-05 00:21:19瀏覽次數(shù):718次

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大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒 實驗?zāi)康模簻y定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中 的含量(性質(zhì))。

大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒

實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠腎素(Renin)水平。用純化的大鼠腎素(Renin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腎素(Renin)再與 HRP標記的羊抗鼠抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。 TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠腎素(Renin)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠腎素(Renin)濃度。

樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收

集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再

次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存

過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000

轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,

細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心

20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次

離心
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保

存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻

漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后

一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬

上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

檢測范圍:

10ng/L -200ng/L

保存條件及有效期:
1     2-8℃。
2     6個月

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