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一直以來(lái),ELISA試劑盒以其敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的長(zhǎng)處,在科研中深受廣闊,科研工作者的喜歡.而市面上各種試劑盒,不計(jì)其數(shù).讓咱們都發(fā)生了,挑選性綜合癥,也挑不出自已的那個(gè)試劑盒.如今咱們公司列出了一下,一些選購(gòu)的常識(shí),期望能為咱們選購(gòu)時(shí)提代一協(xié)助.
單克隆抗體和多克隆抗體都可以用于ELISA試劑盒,ELISA試劑盒實(shí)際上有時(shí)候二者作用非常好。例如,對(duì)于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢查有時(shí)更有協(xié)助。多抗可以保證捕獲一切抗原,隨后單抗再特異性檢查具有特定抗原表位的抗原。
假如抗體間發(fā)生沖突或穿插反響就會(huì)影響全部試驗(yàn)的特異性。其間抗體來(lái)歷所帶來(lái)的兼容性即是穿插反響的一個(gè)要素。雖然如今采購(gòu)源自動(dòng)物的抗體越來(lái)越簡(jiǎn)單,咱們?nèi)杂斜匾姓J(rèn)一下是不是會(huì)發(fā)生穿插反響的疑問(wèn)。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢查時(shí),檢查用的二抗有必要特異性對(duì)于檢查一抗,而不能與捕獲抗體起反響。假如檢查用二抗與捕獲抗體,試驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。一般咱們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢查一抗,來(lái)避免上述疑問(wèn)。
ELISA試劑盒雖然有多種類(lèi)型,不過(guò)它們都有一個(gè)一起特色,即是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲方式包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑駁ELISPOT是兩種特別的類(lèi)型,In-cell ELISA需求將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化,然后再用抗體原位檢查。ELISPOT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞,然后在膜上檢查細(xì)胞排泄的抗原形成斑駁。此外,咱們還需求依據(jù)本身需求挑選96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA試驗(yàn)。
如今檢查ELISA有很多途徑,咱們可以依據(jù)自個(gè)的偏好進(jìn)行挑選。一般ELISA檢查的是酶促反響的可溶性產(chǎn)物,抗體上有相應(yīng)的酶(例如一般運(yùn)用的辣根過(guò)氧化物酶HRP),而反響系統(tǒng)中增加有相應(yīng)的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。這種酶促反響生成具有特征性的色彩,可以通過(guò)分光光度計(jì)進(jìn)行檢查,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以在一抗上,也可以在二抗上,還可以運(yùn)用鏈霉親和素符號(hào)的酶與親和素符號(hào)的一抗。此外ELISA的成果檢查還包含放射性檢查、熒光檢查、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢查等。
以上是咱們就客戶(hù)在采購(gòu)ELISA試劑盒時(shí)咨詢(xún)疑問(wèn),宣布的一點(diǎn)鄙見(jiàn),期待咱們拍磚糾正.
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