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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

大腸菌群快速紙片檢測試劑盒(飲用水、礦泉水)使用說明

時間:2011-6-3閱讀:2459

【包裝規(guī)格】30份/盒 共450張
【預(yù)期用途】用于生活飲用水、飲用天然礦泉水等水源中的大腸菌群檢測。
【檢驗原理】應(yīng)用滅菌的濾紙吸收選擇性培養(yǎng)基,細(xì)菌通過濾紙纖維膨脹而被固定并生長繁殖,大腸菌群在發(fā)育時伴隨產(chǎn)生琥珀酸脫氫酶將紙片上的TTC(紅四碳唑)還原成不可逆的Formazane產(chǎn)生紅色色素,即大腸菌在紙片培養(yǎng)上呈紅菌落,菌落周圍產(chǎn)生黃圈是大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結(jié)果。
【儲存條件及有效期】2℃~8℃保存 有效期12個月
【水樣采集】用采水器或其他滅菌器采集水樣500ml放入滅菌瓶內(nèi),如果是經(jīng)加氯處理的廢水,需加1.5%硫酸鈉5ml除去氯。
【方法步驟】
每份預(yù)監(jiān)測水樣,接種水樣總量為55.5ml,分別接種大紙片5張,小紙片10張。每張大紙片接種10ml水樣,5張小紙片每張接種1ml,另5張小紙片接種1︰10稀釋的水樣1ml。接種水樣時要均勻涂布于紙上,用手輕輕壓平,作好標(biāo)記于鋪有濕紗布的搪瓷盤中,測總大腸菌群37±1℃培養(yǎng)18~24h觀察結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
1、 紙片上出現(xiàn)紫紅色菌落,其周圍有黃圈者為陽性。
2、 紙片為一種顏色,無菌落生長者為陰性。
3、 紙片呈紫色,有紫紅色菌落,其周圍無黃圈者為陰性。
4、 酸性食品接種后,紙片變黃,經(jīng)培養(yǎng)后無紫紅色菌落為陰性。
5、 紙片變色呈現(xiàn)不典型菌落,結(jié)果可疑者,應(yīng)做復(fù)發(fā)酵進驗證。
【結(jié)果報告】根據(jù)紙片的陽性片數(shù),查對大腸菌群MPN檢索表,報告之。
【注意事項】
1、應(yīng)避光低溫(10℃以下)保存,并注意防潮,如發(fā)現(xiàn)紙片變?yōu)榉奂t色即為失效。
2、可疑結(jié)果的判斷:
大腸菌群量的多少與結(jié)果的顯示密切相關(guān),可出現(xiàn)3種不同現(xiàn)象:⑴菌量較大(≥103cfu/ml),整個紙片變黃而又無紅色斑點(或紅暈);⑵菌量適中(102~103 cfu/ml),整個紙片也變黃,但有小而密集的紅色斑點;⑶菌量較少(≤102cfu/ml),紙片可呈紫藍色,并有散在或較密集的紅色斑點,其周圍變黃。因此菌量較大時,可能出現(xiàn)可疑現(xiàn)象。此時應(yīng)通過加大樣品稀釋度或進一步做復(fù)發(fā)酵進行證實。其它可疑現(xiàn)象也可通過發(fā)酵實驗進行確認(rèn)。
確認(rèn)試驗的方法:進行確認(rèn)試驗,用滅菌攝子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發(fā)酵管里,置37℃24小時培養(yǎng)后,對其產(chǎn)酸產(chǎn)氣者判為大腸菌群陽性,否則判為陰性。

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