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ELISA試劑盒實驗原理:
本ELISA試劑盒運用雙抗體夾心法測定標本中小鼠尿微量蛋白(ALB)水平。用純化的小鼠尿微量蛋白(ALB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次參加尿微量蛋白(ALB),再與HRP符號的ALB抗體,構成抗體-抗原-酶標抗體復合物,通過*洗刷后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終究的。顏色的深淺和樣品中的尿微量蛋白(ALB)呈正有關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過規范曲線核算樣品中小鼠尿微量蛋白(ALB)濃度。
注意事項:
如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,核算時請zui終乘以總稀釋倍數(×n×5)。本試劑不一樣批號組分不得混用。各步加樣均應運用加樣器,并常常校正其正確性,以避免實驗誤差。ELISA試劑盒從冷藏環境中掏出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗刷液可能會有結晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。嚴厲依照仿單的操縱進行,實驗成果判斷必需以酶標儀讀數為準,一切樣品,洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。請每次測定的一起做標準曲線,*做復孔。底物請避光保存。一次加樣時間*控制在5分鐘內,如標本數目多,引薦運用排槍加樣。如與英文仿單有異,以英文仿單為準。封板膜只限一次性運用,以避免穿插污染。
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