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土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒
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- 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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- 2024-09-03 09:33:41
- 上海市
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【詳細(xì)說明】
商品詳情:
土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒測定意義
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響,根據(jù)最適pH范圍,通常分為酸性、中性和堿性三種類型。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3447 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3447-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
YSH3447-2 | 100管/96樣 | 熒光法 |
測定原理:酸性環(huán)境中,S-ACP催化磷酸苯二鈉水解生成ben酚和磷酸氫二,通過測定酚的生成量即可計算出S-ACP活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、500ml試劑瓶、96%乙醇和甲苯。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
因子VIIIELISA試劑盒 FVⅢ免費(fèi)代測試劑
因子Ⅷ相關(guān)抗原ELISA試劑盒 Ⅷ-Ag免費(fèi)代測試劑
原肽段1+2ELISA試劑盒 F1+2免費(fèi)代測試劑
原前體蛋白ELISA試劑盒 PIVKA-II免費(fèi)代測試劑
原片段F1+2ELISA試劑盒 F1+2免費(fèi)代測試劑
原ELISA試劑盒 PT免費(fèi)代測試劑
血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物ELISA試劑盒 T-TM免費(fèi)代測試劑
敏感蛋白1ELISA試劑盒 TSP-1免費(fèi)代測試劑
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尿肌酐ELISA試劑盒 UCR免費(fèi)代測試劑
土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒磷果糖激酶(PFK)/6磷果糖激酶/果糖6磷激酶測試盒100管/96樣 微量法
磷果糖激酶(PFK)/6磷果糖激酶/果糖6磷激酶測試盒50管/48樣 紫外分光光度法
磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測試盒100管/96樣 微量法
磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測試盒50管/48樣 紫外分光光度法
丙酮(PA)含量測試盒100管/96樣 微量法
丙酮(PA)含量測試盒50管/48樣 可見分光光度法
乳脫氫酶(LDH)測試盒100管/48樣 微量法
乳脫氫酶(LDH)測試盒50管/24樣 可見分光光度法
3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒100管/96樣 微量法
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