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土壤銨態(tài)氮測試盒
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- 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 288 - 552 （具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)）
- 2024-09-03 11:04:14
- 上海市
- 國產(chǎn)
- 1073
【詳細(xì)說明】
商品詳情：
土壤銨態(tài)氮測試盒測定意義
土壤中的銨態(tài)氮可被土壤膠體吸附，呈交換性銨狀態(tài)氮肥，也可溶解在土壤溶液中，能直接被植物吸收利用，屬于速效性氮素。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3420 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3420-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理
土壤中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，在625nm處有特征吸收峰，吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。
自備實(shí)驗用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀。
樣品中AA提取：
1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3.血清等液體：直接檢測。
計算公式如下：
1、血清（漿）LAP活力的計算:
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。
注意事項：
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4．檢出限為100μmol/L。
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