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兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒

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【簡單介紹】

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【詳細說明】

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7.斑點ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)(Dot-ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)) 與常規的微量板ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)比較,Dot-ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)具有簡便、節省抗原等優點,而且結果可長期保存;但其也有不足,主要是在結果判定上比較主觀,特異性不夠高等。該方法的主要操作程序為:(1) 載體膜的預處理及抗原包被 取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后,稍加干燥進行壓圈。將陰性、陽性抗原及被檢測抗原適度稀釋后加入圈中,置37℃使硝酸纖維素膜*干燥。每張7cm×2.3cm的膜一般可點加40-53個樣品,每個壓圈可加抗原液1-20μl。   (2) 封閉 將硝酸纖維素膜置于封閉液中,37℃感作15-30分鐘。封閉液多采用含有正常動物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。   (3) 加被檢血清 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再加入一定量適度稀釋的待檢血清,37℃反應一定時間,用洗滌液洗三次,每次1-3分鐘。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。   (4) 加酶標抗體,37℃反應一定時間后,用洗滌液洗三次。   (5) 顯色 加入新鮮配制的底物液,37℃反應一定時間后,去掉底物液,加蒸餾水洗滌終止反應。   (6) 結果判定 以陽性、陰險血清作為對照,膜片中央出現深棕紅色斑點者為陽性反應,否則為陰性反應。  

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