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ELISA實驗加樣步驟不當可能會影響實驗結果及解決方法
閱讀：1740 發布時間：2014-8-18ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床跟科研得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節操作不當可能會對實驗的檢測結果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。現我公司技術人員將加樣操作中常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以便給同行帶來一些啟發，提高試驗質量：
加樣 可能原因：
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)；
3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1) 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。