技術文章
切片的清洗方法及注意事項
閱讀:2396 發布時間:2015-12-30上海恒遠生物科技有限公司提供免費代做ELISA實驗,WB實驗按樣收費。各種技術問題可提供一對一的服務。昨日,我司技術部負責人歐陽技術在給中科院物理研究所高老師關于切片的清洗方法分析介紹到:為了防止一抗、二抗等試劑殘留而引起非特異性染色,所以適當地加強清洗(延長時間和增多次數)尤為重要,一般要求在一抗孵育前的清洗是3 min*3次,而一抗孵育后的清洗均為5次*5 min。
注意事項:
(1)單獨沖洗,防止交叉反應造成污染。
(2)溫柔沖洗,防止切片的脫落。可以選擇用浸洗方式;
(3)沖洗的時間要足夠,才能*洗去結合的物質。
(4)PBS的PH和離子強度的使用和要求。建議PH在7.4-7.6濃度是0.01 M。(中性及弱鹼性條件(PH7-8)有利于免疫復合物的形成,而酸性條件則有利于分解;低離子強度有利于免疫復合物的形成,而高離子強度則有利于分解)。