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“上海恒遠(yuǎn)”文獻(xiàn):6種介類中藥對(duì)大鼠甲狀腺腫大模型影響的實(shí)驗(yàn)研究

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彭倩倩 洪寅 廖廣輝

浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 杭州 310053

摘要:[目的]觀察牡蠣、石決明、瓦楞子、珍珠母、紫貝齒、蛤殼 6 種介類中藥對(duì)大鼠甲狀腺腫大的影響。[方法]72 只健康 SD 大鼠隨機(jī)分為 9 組:正常組、模型組、陽(yáng)性組及 6 個(gè)介類中藥組。每日灌胃丙硫氧嘧啶(0.15g·kg-1),連續(xù)造模 10d,稱量甲狀腺濕重,酶聯(lián)免疫法測(cè)血清 T3、T4、TSH 含量,觀察光鏡下甲狀腺的形態(tài)變化。[結(jié)果]模型組大鼠較正常組甲狀腺相對(duì)重量增加,T3、T4 含量降低,且均有顯著性差異(P<0.01),甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞增生明顯;與模型組比較,牡蠣、蛤殼組使大鼠 T3、T4 含量均回升,且均有顯著性差異(P<0.05);牡蠣、蛤殼組甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞增生不明顯,其他 4 種介類中藥組均有不同程度的增生。[結(jié)論]牡蠣、蛤殼對(duì)甲狀腺腫模型大鼠甲狀腺功能均有較好的改善作用。

關(guān)鍵詞:介類中藥;甲狀腺腫大;大鼠

中圖分類號(hào):R331    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1005-5509(2013)12-1429-04

 

介類指有甲殼的蟲(chóng)類或水族,介類中藥是指將介類之殼、甲作為藥用部分,在中醫(yī)藥理論體系指導(dǎo)下運(yùn)用的藥物。藥性多偏寒涼,大多味咸,主入肝經(jīng), 性均沉降。其使用主要受“介類潛陽(yáng)”“咸能軟堅(jiān)”等藥性理論指導(dǎo),功效表達(dá)主要為平肝潛陽(yáng)、軟堅(jiān)散結(jié)、滋陰安神、煅用內(nèi)服“制酸止痛”、外用“斂瘡生肌”等。本文基于介類中藥多味咸而具軟堅(jiān)散結(jié)作用,選定臨床常用的 6 種介類中藥,通過(guò)甲狀腺腫模型大鼠,來(lái)探討介類中藥對(duì)大鼠甲狀腺腫大的療效影響,以期能為臨床準(zhǔn)確的運(yùn)用介類中藥及“咸能軟堅(jiān)”理論提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1實(shí)驗(yàn)材料

動(dòng)物與藥材 雄性 SD 大鼠 72 只,體重 200-250g,由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。珍珠母:杭州華東中藥飲片有限公司, 產(chǎn)地浙江, 批號(hào)

121105。其他 5 種介類中藥均購(gòu)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片廠,產(chǎn)地、批號(hào)依次為:牡蠣(浙江,121001)、石決明(廣東,121101)、瓦楞子(浙江,100811)、紫貝齒

(海南,121001)、蛤殼(浙江,121001)。

1.2藥品與試劑 丙硫氧嘧啶片(上海朝暉藥業(yè)有限公司生產(chǎn),國(guó)藥準(zhǔn)字:H31021082);左甲狀腺素鈉片

(進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào):H20100523);血清 T3、T4、TSH酶聯(lián)免疫分析 Elisa 試劑盒(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司);水合氯醛(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司, 分析純,批號(hào) 20101218)。

1.3儀器 SL 型電子稱(上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司);AL104 電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司);HC-3018 高速離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司);MK3 型酶標(biāo)儀(賽默飛世爾上海儀器有限公司)。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1樣品制備 (1)分別稱取牡蠣、石決明、瓦楞子、珍珠母、紫貝齒、蛤殼 6 種藥材一定量,按中藥水煎液方法煎煮,終分別濃縮為含生藥量 0.22g·mL-1、 0.15g·mL -1、0.12g·mL -1、0.18g·mL -1、0.12g·mL -1、0.12g·mL-1。(2)丙硫氧嘧啶片:用蒸餾水配成質(zhì)量濃度為 10g·mL-1  的藥液。(3)左甲狀腺素鈉片:用蒸餾水配成質(zhì)量濃度為 1.5μg·mL-1  的藥液。

2.2動(dòng)物分組 72 只 SD 大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、陽(yáng)性組、牡蠣組、石決明組、瓦楞子組、珍珠母組、紫貝齒組、蛤殼組,共 9 組,每組 8 只。

給藥方法[1-3] 除正常組外,其他各組每日給大鼠按 0.15g·kg-1  灌胃丙硫氧嘧啶造模,連續(xù)造模 10d,正常組每日灌胃等量蒸餾水。所有動(dòng)物在造模的同時(shí),每日正常飲食、飲水。在造模的同時(shí),陽(yáng)性組每日灌胃給藥甲狀腺素藥液 18μg·kg-1,6 個(gè)中藥組分別每日灌胃各中藥水煎液,劑量分別為:牡蠣 2.7g·kg-1,1,紫貝齒 1.35g·kg-1,蛤殼 1.35g·kg-1。以上劑量均按動(dòng)物體表面積系數(shù)折算,正常成年人與 200g 大鼠的折算系數(shù)為 0.018。

2.4標(biāo)本采集 給藥結(jié)束觀察一周后,處死大鼠,處死前稱量體重,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,腹主動(dòng)脈取血,3500r/min 離心 10min,獲取血清,于-20℃冰箱保存,運(yùn)用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清 T3、T4、TSH 水平。處死后,迅速準(zhǔn)確地分離甲狀腺,電子天平稱濕重,迅速放入 10%甲醛中固定。甲狀腺固定 24~48h 后,石蠟包埋,切片。取甲狀腺大切片常規(guī) HE 染色,于光鏡下觀察和比較甲狀腺組織的形態(tài)變化。

2.5數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)采用 SPSS 13.0 統(tǒng)計(jì)軟件, 經(jīng)方差分析和 t 檢驗(yàn)分析各組間的差異性,P<0.05 為有顯著性差異。統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)以 x±s 表示。

 

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