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“上海恒遠”文獻：IMD對缺血ATP敏感性鉀通道的作用研究
閱讀：438 發布時間：2019-7-4“上海恒遠”文獻：IMD對缺血-再灌注心肌保護ATP敏感性鉀通道的作用研究
衛雷 成尚霖 馬捷
【摘要】目的 觀察心肌缺血期處理后在體大鼠心肌缺血- 再灌注損傷中中介素(Intermedin IMD) 參與情況下的保護機制 ； 研究IMD對心肌細胞的保護作用是否途經ATP敏感性鉀通道(ATP-sensitive potassium channel，KATP)，為探討心肌保護機制提供臨床思路。方法 選取標準SD 大鼠45 只，隨機分為缺血再灌注組(I/R 組)、IMD 治療組(IMD 組)、格列本脲+IMD 治療組(Gli+IMD 組)，每組15 只。各組分別于再灌注末期分別抽取動脈血3ml，用比色法測定血清CK 和LDH，用ELISA 法測cTnI活性。取心尖部心肌組織，10% 甲醛液固定，石蠟包埋，后在光鏡下觀察心肌損害程度。結果 IMD 組與I/R 組比較，P <0.01 ；
Gli+IMD 組與I/R 組、IMD組比較，P <0.05。結論 IMD在心血管系統中具有保護作用且其機制可能與其激活了ATP敏感性鉀通道相關。
【關鍵詞】ATP 敏感性鉀通道；缺血再灌注；IMD；心肌保護
doi:10.3969/j.issn.1673-5552.2011.22.0010
【中圖分類號】R364.1 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-5552(2011)22-0021-02
缺血性心臟病(IHD) 已成為西方國家人口死亡的重要原因， 在我國已經上升至人口死亡原因的第二位[1]。關于IHD 的治療首先是恢復血液灌注，其目的在于解除組織的缺氧和營養物質供應不足的狀態，以阻止缺血性損傷的發展或促使其恢復[2]。在對缺血再灌注(Ischemia-reperfusion injury I/R) 損傷的機制研究中，中介素(Intermedin IMD) 也稱腎上腺髓質素2(ADM-2)，是2003 年至今新近確認的降鈣素基因相關肽超家族成員，廣泛表達于嚙齒類動物大腦、垂體、腎臟、心臟、肺臟、胃腸道、卵巢，血管內皮細胞[3]。IMD 同家族成員如ADM和CGRP具有多種生物學效應，對多個器官系統有調節作用，已被諸多文獻證實具有很強的心血管保護作用。IMD 是一種新的內源性抗損傷保護物質，可能作為心血管疾病防治的新靶點[4,5]。因此，IMD 在心肌缺血再灌注損傷中的保護作用及其機制值得進一步研究。
1材料與方法
1.1實驗動物
選用雄性SD大鼠45 只，體重240-300g( 由山西醫科大學實驗動物中心提供)，在常規條件下飼養，普通飲食，自由飲水。
1.2藥品、試劑和儀器
IMD( 美國Phoenix 公司)、格列本脲( 上海研域化學試劑有限公司)，cTnI 試劑盒(Biosource 公司)，乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK) 試劑盒( 上海恒遠生化試劑有限公司) ；微型動物呼吸機( 浙江醫科大學醫療儀器實驗廠) ；心電圖機( 上海奧爾科特生物科技有限公司)。
1.3I/R 模型的制備
大鼠稱重后以20% 烏拉坦溶液(4ml/kg) 腹腔注射麻醉，仰臥固定，將心電圖針狀電極插入大鼠四肢皮下，描記肢體Ⅱ導聯心電圖。常規左側胸前區備皮，頸正中切開皮膚，鈍性分離頸前肌，氣管切開置管，連接微型動物呼吸機控制呼吸 ；分離出右頸總動脈，用于插管采集血液樣本。沿胸骨左緣第4、5 肋間順勢剪開心包，充分暴露心臟及左心室表面血管，以左冠狀動脈前降支(LAD) 為標志，在左心耳根部下方0.3-0.4cm 處進針，6/0 絲線( 結扎線) 穿過心肌組織在肺動脈圓錐旁出針，結扎線兩端分別套入絲線環作為再灌注拉線，收緊結扎線使左冠脈前降支閉塞30min，以造成心肌缺血。成功標志為 ：心電圖ST 段弓背向上抬高和結扎線以下血管支配區表面顏色由正常變蒼白再變青紫示為心肌缺血。牽拉再灌注拉線使結扎線放松后恢復血流即行再灌注2h，造成I/R 模型。
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