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脂肪酶活性測(cè)定方法
閱讀：3654 發(fā)布時(shí)間：2011-6-27| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 124.6KB |
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脂肪酶活性測(cè)定方法
1、粗酶液的制備 用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g， 用蒸餾水溶解并定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。
2、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 本實(shí)驗(yàn)以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應(yīng)時(shí)間為因素，通過酸價(jià)的測(cè)定選定其水解的*條件。
3、酸價(jià)的測(cè)定 酸價(jià)是指中和1 mol游離脂肪酸所需NaOH的毫克數(shù)， 它用于衡量油脂的水解程度。實(shí)驗(yàn)中用酸堿滴定法測(cè)定水解液的酸價(jià)， 參照文獻(xiàn)[ 3， 4 ]中所使用的方法， 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液， 搖勻， 終止反應(yīng)， 并加入2滴酚酞指示劑， 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微紅色， 在30 s內(nèi)不消失為終點(diǎn)， 記錄消耗的NaOH溶液毫升數(shù)（V ） 。用同樣的方法測(cè)定空白值， 每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)兩次， 以平均值作為測(cè)定結(jié)果。 酸價(jià)按下式計(jì)算： X = C （V - V0 ） ×40 /M 式中: X —油脂酸價(jià)（mgNaOH /g油） C—NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L） M —試樣的質(zhì)量（ g） 40—NaOH的mmol質(zhì)量（mg/mmol）
4 、粗脂肪酶活力的測(cè)定 在*水解條件下， 分別測(cè)得粗脂肪酶和標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶水解液的酸價(jià)X1、X2 ， 根據(jù)公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力， 其中U1為粗脂肪酶活力， U為標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶活力。
5、標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶液的配制 根據(jù)實(shí)驗(yàn)*條件， 配制標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶液。一篇相關(guān)文獻(xiàn) 粗脂肪酶活力的測(cè)定方法的研究.pdf 答：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，本實(shí)驗(yàn)以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度、反應(yīng)時(shí)間為因素，通過酸價(jià)的測(cè)定選定其水解的*條件。用色拉油作底物不太妥，一般是用橄欖油，化學(xué)純的。