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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司>供求商機(jī)>雞白介素17 ELISA試劑盒
雞白介素17 ELISA試劑盒
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  • 雞白介素17 ELISA試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 美國
更新時間: 2024-10-30 21:00:07
期: 2024年10月30日--2025年4月30日
已獲點(diǎn)擊: 116
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產(chǎn)品簡介

上海恒遠(yuǎn)公司提供進(jìn)口“雞白介素17 ELISA試劑盒" ,本公司代理國外R&D品牌試劑盒,各種標(biāo)本、種屬、具體指標(biāo)齊全,品種多,質(zhì)量好,靈敏度高,詢價或在線咨詢。

詳細(xì)介紹

 

Chicken白介素17IL-17ELISA檢測試劑盒

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿

試驗原理

        IL-17試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA.已知IL-17濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-17和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物AB,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-17的濃度呈比例關(guān)系。 

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶標(biāo)板

1塊板(96T

半塊板(48T

塑料膜板蓋

1

半塊

標(biāo)準(zhǔn)品:500pg/ml  

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

空白對照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

生物素標(biāo)記的抗IL-17抗體

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

親和鏈酶素-HRP

1瓶(12ml

1瓶(5ml

洗滌緩沖液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

終止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

 自備材料

1.  蒸餾水。

2.  加樣器:5ul10ul50ul100ul200ul500ul1000ul

3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

樣品收集、處理及保存方法 

1、 血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2  血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3  細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4  組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

 5  保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

雞白介素17試劑盒操作注意事項 

   試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

   實(shí)驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

   使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

   底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

   加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

   按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

安全性 

1.   避免直接接觸終止液和底物AB,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2.   實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。 

試劑的準(zhǔn)備 

1.   標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

500

pg/ml

6號標(biāo)準(zhǔn)品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

250

pg/ml

5號標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

125

pg/ml

4號標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

62.5

pg/ml

3號標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

31.2

pg/ml

2號標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

15.6

pg/ml

1號標(biāo)準(zhǔn)品)

100ul2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0

pg/ml

(空白對照)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

2.   洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。 

試劑盒性能 

1.   靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990

2.   特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3.   重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10% 

雞白介素17試劑盒操作步驟 

1.   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2.   根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37溫育45分鐘。

4.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7.   每孔加入底物AB50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。

8.   取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9.   450nm波長處測定各孔的OD值。 

結(jié) 果 判 斷 與 分 析 

1、  儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD

2、  以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IL-17標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IL-17含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

3、  檢測值范圍: 0-500pg/ml

4、  敏感度:1.0pg/ml

 

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