詳細(xì)介紹
MIGF,CXCL9,人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子
產(chǎn)品名稱:人MIGF/CXCL9 ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名:人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子ELISA試劑盒
英文名稱:Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
ELISA關(guān)鍵步驟為以下幾點(diǎn):
1、盡量用八道或者十二道移液器加樣。對(duì)于相同的試劑,經(jīng)如二抗,酶,顯色液,終止液等。
2、自己的樣品,因?yàn)槊恳豢椎臉悠凡灰粯?,用排槍加有些麻煩,如果一次的樣品比較少,而自己加樣又比較快,可以一個(gè)孔一個(gè)孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先擺好一些PCR管或者準(zhǔn)備一個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養(yǎng)板中(此板間距與酶板板相同)。記得加一定的余量,如一次加樣是50ul,可以先加70ul。加完后再用排槍加樣,這樣可以縮短加樣時(shí)間,減小每個(gè)孔間的時(shí)間誤差。
3、如果有多余的孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔可以做復(fù)孔,在自己的樣品前加一次標(biāo)準(zhǔn)品,加完樣品后再加一次標(biāo)準(zhǔn)品。如果孔不夠,那么可以將標(biāo)準(zhǔn)品放在樣品中間加。
1、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對(duì)。
2、ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度,建議過(guò)夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
6、若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
7、當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
MIGF,CXCL9,人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子