詳細介紹
sCKR,人可溶性細胞因子受體,酶免試劑盒
產品名稱:人sCKR ELISA試劑盒
產品別名:人可溶性細胞因子受體ELISA試劑盒
英文名稱:Human soluble cytokine receptor,sCKR ELISA KIT
產品規格:96T/48T
ELISA關鍵步驟為以下幾點:
1、盡量用八道或者十二道移液器加樣。對于相同的試劑,經如二抗,酶,顯色液,終止液等。
2、自己的樣品,因為每一孔的樣品不一樣,用排槍加有些麻煩,如果一次的樣品比較少,而自己加樣又比較快,可以一個孔一個孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先擺好一些PCR管或者準備一個96孔細胞培養板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養板中(此板間距與酶板板相同)。記得加一定的余量,如一次加樣是50ul,可以先加70ul。加完后再用排槍加樣,這樣可以縮短加樣時間,減小每個孔間的時間誤差。
3、如果有多余的孔,標準品孔可以做復孔,在自己的樣品前加一次標準品,加完樣品后再加一次標準品。如果孔不夠,那么可以將標準品放在樣品中間加。
用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
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加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
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于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml, 37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
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加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
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終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
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結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
sCKR,人可溶性細胞因子受體,酶免試劑盒