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人CagA ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名:人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A ELISA試劑盒
英文名稱:Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
(2)待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無抗原,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì),使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,保溫后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量。洗滌。
(3)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標(biāo)本中抗原含量越多。
Elisa間接法、競爭法、捕獲法,應(yīng)用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成,可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物素又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來,就可大大提高ELISA的敏感度。
CagA,ELISA試劑盒,人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A