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技術部對酶聯免疫雙位點一步法評價
閱讀：1380 發布時間：2014-10-24 通常每周五上海恒遠都有資訊分享給大家，我公司今天要給大家帶來的內容是實驗室技術部對酶聯免疫雙位點一步法的評價，夏將此具體內容整理出，發布出分享給大家。
·操作步驟
1.將1個McAb與固相載體連接，形成固相McAb。洗滌除去未結合物。
2.同時加入待檢標本和酶標McAb，溫育，是待檢抗原和固相McAb及酶標McAb反應形成雙抗體夾心復合物。洗滌除去未結合物。
3.加底物顯色。
適用于雙抗體夾心法的酶聯免疫試劑盒，有些也可用雙位點一步法檢測。如HBsAg同樣可用此法進行檢測，其原理為：將純化的抗HBs吸附于固相載體表面，加入待檢血清(或血漿)，同時加入辣根過氧化物酶標記的另一個抗HBs(酶結合物)，如血清或血漿中含有HBsAg，則通過溫育形成固相McAb-HBsAg-酶標McAb復合物，加入底物，通過顯色反應進行測定。若血清或血漿中不含HBsAg，通過洗滌除去未結合物，加底物后就不顯色。
上海恒遠技術部做出評價：“由于應用McAb，雙位點一步法具有很高特異性，一步法省時、簡便。當待檢抗原濃度過高時，大量過剩抗原分別飽和固相McAb和酶標McAb而抑制夾心復合物的形成，這種現象稱為鉤狀效應，可出現假陰性結果。可將待檢標本稀釋后再做或提高抗體試劑的親和力、濃度、純度定以消除鉤狀效應。”
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