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保存Abcam抗體的這些要求有哪幾條您不知道?

閱讀:1464          發布時間:2015-5-14

    進口的Abcam抗體大多價格昂貴,如保存不當除造成的經濟損失以外還可能會導致實驗的不成功,直接耽誤科研工作的進展。那我們應該如何保Abcam抗體呢,讓上海恒遠于您一起來分享一下。

*、保存溫度和條件

    對于很多抗體而言,分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是*保存條件。分裝成小等份可zui大程度減少由凍融造成的損傷,以及從單個試劑瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需凍融一次,如有剩余,可將剩余物保存于4℃。在收到抗體時,在10000×g下離心20秒以沉積截留于試劑瓶螺紋的溶液,并以小等份轉移至低蛋白結合微量離心管中。小等份的量取決于實驗人員在實驗中通常采用的量。小等份應不小于10μl;等份越小,儲液濃度因抗體蒸發及吸附于保存瓶表面而受到的影響越大。

    在大多數情況下,收到抗體時在4℃下保存一至兩周,然后再冷凍進行長期保存是可以接受的,但也許腹水液是例外,它可能包含蛋白酶,因而應該盡快凍存。同樣,遵照數據表上的建議是重要的.

第二、用*防止污染

    為了防止微生物污染,可將*加入抗體制備品中達到0.02%(w/v)的終濃度。很多abcam抗體已經包含這種防腐劑,所用濃度范圍為0.02至0.05%。

第三、避免反復凍融

    重復冷凍/融化循環可使抗體變性,導致其形成使抗體結合能力降低的聚集物。

    保存于-20℃對于大多數抗體是適當的;保存于-80℃無明顯優勢。冰箱不能為無霜型。這些冷凍和融化之間的循環(以減少結霜)恰恰是應該避免的。出于相同原因,抗體試劑瓶應置于具有zui小溫度波動的冰箱區域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。

    有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到50%的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點降低至低于-20℃。雖然這對于很多抗體是可接受的,但是只有一小部分我們提供的抗體測試了在該保存條件下的穩定性,并且我們的保證僅使用于按數據表上推薦的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于-80℃,因為該溫度低于甘油的凝固點。請注意甘油可被細菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護劑,則應當小心操作,以得到無菌制備物。

    應避免抗體在稀釋至工作濃度后在4℃下保存超過一天。蛋白質在高濃度下保存時一般不易降解,理想的濃度為1mg/ml或更高。這是在抗體溶液中加入蛋白質例如BSA作為穩定劑的理論基礎。加入的蛋白質也有助于減少抗體因結合于容器壁上而造成的損失。對于打算進行偶聯的抗體而言,由于穩定蛋白質會與抗體競爭,降低了偶聯的效率,所以不應加入穩定蛋白質。

    以上幾點保存Abcam抗體的這些要求有哪幾條您不知道?針對以上要求、方法,同樣也適用于其他抗體,希望我們的這些建議對您的實驗也幫助,上海恒遠祝您實驗成功。

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