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一些常用ELISA方法優(yōu)劣對(duì)比,選擇您適合的實(shí)驗(yàn)方法
閱讀：1226 發(fā)布時(shí)間：2017-10-10 總所周知ELISA試劑盒可分為多種類型測定，是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。 上海恒遠(yuǎn)將各種ELISA常用方法的優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果如下：
一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
1.優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
2.劣勢(shì)：試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記，但不是每種抗體都適合做標(biāo)記，費(fèi)用相對(duì)提高。
二、間接法
此測定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測定抗原量。
1.優(yōu)勢(shì)：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。
2.劣勢(shì)：交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。
三、雙抗體夾心法
被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測抗體，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量；或不標(biāo)記，再透過酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。
1.優(yōu)勢(shì)：高靈敏、高專一性，抗原無須事先純化。
2.劣勢(shì)：抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
四、競爭法
樣本里的抗原(自由抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起競爭相同的抗體，當(dāng)樣品里的自由抗原越多，就可以結(jié)合越多的抗體，而固定抗原就只能結(jié)合到較少的抗體，反之亦然。經(jīng)清洗步驟，洗去自由抗原和抗體的復(fù)合物，只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物，拿來與只有固定抗原的對(duì)照組結(jié)果相比較，根據(jù)呈色差異就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
1.優(yōu)勢(shì)：可適用比較不純的樣本，而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
2.劣勢(shì)：整體的敏感性和專一性都較差。
五、ELISA試劑盒技術(shù)：基于細(xì)胞法
是一種新的定性蛋白檢測技術(shù)，將細(xì)胞直接在微孔板里培養(yǎng)，待檢測時(shí)，不需抽提蛋白和裂解細(xì)胞，便可直接測量微孔板里蛋白經(jīng)刺激或抑制作用后的變化。
1.優(yōu)勢(shì)：無需裂解細(xì)胞，所以目標(biāo)蛋白損失zui少，可測定完整細(xì)胞、黏附細(xì)胞、還有非粘附細(xì)胞。
2.劣勢(shì)：不能測定抗原量。
相信看完上面的介紹您對(duì)ELISA各種方法的優(yōu)劣勢(shì)都有一定的了解的吧！您可根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇出你的實(shí)驗(yàn)方法！當(dāng)然如果您沒時(shí)間沒精力去做實(shí)驗(yàn)，您還可以把樣本寄給我們，我們可以免費(fèi)為您代測。歡迎廣大用戶來電，上海恒遠(yuǎn)將本著 “專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的精神，熱誠為每一位客戶提供zui的服務(wù)！
